草果知母汤对戊四唑慢性诱导癫痫模型大鼠脑内海马区凋亡调控因子p53蛋白表达的影响

目的:动态观察具有调理脾胃气机作用的草果知母汤在阻抗癫痫形成中对大鼠大脑海马区凋亡调控因子p53蛋白表达的影响,分析其抗痫作用的分子生物学途径。方法:实验于2005-03/12在广西中医学院基础医学院中医实验中心完成。选择雄性SD大鼠82只,按随机数字表法分为4组,模型组26只,中药治疗组及西药治疗组各25只,正常对照组6只。模型组及中、西药治疗组均以戊四唑亚惊厥剂量35mg/kg腹腔注射,1次/d,持续4周,诱导癫痫模型。正常对照组同法给予相同剂量的生理盐水。各组在造模同时即开始给药,中药治疗组予草果知母汤液(由草果、知母、厚朴、半夏、黄芩等组成)5g/(kg·d)灌胃;西药治疗组予苯巴比妥混悬液60mg/(kg·d)灌胃;模型组和正常组胃饲双蒸水,2mL/(kg·d);1次/d,持续5周。采用Smialowki6级评分法进行行为学观察(1级,节律性点头或头部颤搐;6级,强直性惊厥)。正常对照组在实验第5周末取材,其他各组分别在实验第2,3,4,5周末取材。采用免疫组化PV-600二步法标记p53蛋白阳性细胞,比较各组大鼠脑海马区p53蛋白表达值在癫痫慢性形成过程中的变化。结果:进入结果分析78只,模型组、中药治疗组及西药治疗组各24只,正常对照组6只。①癫痫形成不同时间段惊厥等级得分:模型组大鼠1周后逐渐出现癫痫发作,并随点燃次数不断增强,至第4周出现6级大发作;中、西药治疗组发作次数和级别明显降低,最高级别为4级,且两组间发作级别、次数相比差异无显著性意义(P>0.05)。②凋亡调控因子p53蛋白标记的阳性细胞数:至实验第3,4,5周,模型组大鼠脑海马区p53蛋白表达数量显著高于正常对照组(P<0.05～0.01),中、西药治疗组大鼠脑海马区p53蛋白表达数量均显著低于模型组(P<0.05～0.01);在相同时间段(2,3,4,5周)中、西药治疗组间比较差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:草果知母汤可有效地阻断癫痫发作,其抗痫作用可能与抑制癫痫形成过程中大鼠脑内凋亡调控因子p53蛋白表达有关。

Influence of Tsaoko-Anemarrhenae Decoction on p53 protein expression in hippocampus of rat models with epilepsia chronically induced by pentylenetetrazol