| 人线粒体核糖体蛋白S17 cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达和纯化 |
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| 引用本文： | 杨斌,郝飞,杨卫兵,杨希川,钟白玉.人线粒体核糖体蛋白S17 cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达和纯化[J].解放军医学杂志,2006,31(1):42-44. |
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| 作者姓名： | 杨斌 郝飞 杨卫兵 杨希川 钟白玉 |
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| 作者单位： | 400038,重庆,第三军医大学西南医院皮肤科;400038,重庆,第三军医大学西南医院皮肤科;400038,重庆,第三军医大学西南医院皮肤科;400038,重庆,第三军医大学西南医院皮肤科;400038,重庆,第三军医大学西南医院皮肤科 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目;同济大学校科研和教改项目;中华医学会-欧来雅中国人健康皮肤研究项目;第三军医大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 目的克隆人MRPS17cDNA,并在大肠杆菌中表达纯化。方法从人原代培养毛乳头细胞中分离总RNA,采用RTPCR及序列测定等方法获得人MRPS17cDNA,然后克隆至原核表达载体pET28a,转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;C末端融合了6×His纯化标签的表达产物行Western印迹法分析并用Ni2 NTA离子交换树脂进行纯化;纯化蛋白行SDSPAGE纯度分析。结果获得了人MRPS17cDNA,与GenBank报道的序列一致,并成功构建了高效原核表达质粒pET28aMRPS17;Western印迹结果表明,经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达了分子量约13kD的目的蛋白;表达产物经Ni2 NTA离子交换树脂纯化,纯度>90%。结论克隆得到了人MRPS17cDNA,并在E.coli中成功表达和纯化了MRPS17蛋白,为后续研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 核糖体蛋白质类 DNA 互补 基因表达 |
| 收稿时间： | 2005-05-20 |
| 修稿时间： | 2005-09-17 |
Cloning, expression and purification of human MRPS17 cDNA in Escherichia coli |
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| Yang Bin,Hao Fei,Yang Weibing et al.Cloning, expression and purification of human MRPS17 cDNA in Escherichia coli[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2006,31(1):42-44. |
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| Authors: | Yang Bin Hao Fei Yang Weibing |
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| Institution: | Yang Bin,Hao Fei,Yang Weibing et al. Department of Urology,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ribosomal proteins DNA complementary gene expression |
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