| 小鼠Cdc14A基因真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 刘儒,谢基明,孟峻,李瑞林.小鼠Cdc14A基因真核表达载体的构建[J].检验医学与临床,2019,16(13):1891-1893. |
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| 作者姓名： | 刘儒 谢基明 孟峻 李瑞林 |
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| 作者单位： | 内蒙古医科大学附属医院检验科,内蒙古呼和浩特,010050;内蒙古自治区人民医院检验科,内蒙古呼和浩特,010017 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（81360109、81660267） |
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| 摘 要： | 目的构建小鼠pcDNA3.1-MYC-细胞分裂周期14A(Cdc14A)真核表达载体,并观察和验证其在真核细胞中的表达。方法将化学合成的目的基因Cdc14A定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经酶切和测序鉴定正确后,采用脂质体法转染HEK293细胞,通过Westernblot检测细胞内Cdc14A的表达,并检测Cdc14A基因序列。结果pcDNA3.1-MYC-Cdc14A真核表达载体构建成功,将其转染HEK293细胞48h,提取细胞蛋白,采用Westernblot检测到细胞内Cdc14A的表达,并且测序结果与预期结果一致。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-MYC-Cdc14A,为研究Cdc14A在小鼠一细胞期受精卵G2/M期转换中的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 真核表达载体 细胞分裂周期14A HEK293细胞 |
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