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幽门螺杆菌基因hpaA克隆、融合表达和鉴定
引用本文:黄学勇,段广才,范清堂,郗园林,黄志刚,宋春花. 幽门螺杆菌基因hpaA克隆、融合表达和鉴定[J]. 中国人兽共患病杂志, 2007, 23(3): 274-277,281
作者姓名:黄学勇  段广才  范清堂  郗园林  黄志刚  宋春花
作者单位:郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,河南省分子医学重点学科开放实验室,郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,郑州大学公共卫生学院流行病学教研室 郑州450052,河南省分子医学重点学科开放实验室,郑州450052,郑州450052,河南省分子医学重点学科开放实验室,郑州450052,郑州450052,郑州450052,郑州450052,河南省分子医学重点学科开放实验室,郑州450052,郑州450052
基金项目:河南省医学科技人才创新工程项目
摘    要:目的克隆幽门螺杆菌粘附素基因hpaA,构建幽门螺杆菌hpaA基因与麦芽糖结合蛋白基因融合表达载体,并进行诱导表达,鉴定融合蛋白免疫原性,为幽门螺杆菌疫苗研究提供依据。方法利用PCR技术从H.pylori郑州分离株MEL-HP27染色体DNA上扩增出hpaA基因,序列分析后,将其克隆到表达载体pMAL-c2X中,转化大肠杆菌(E.coliTB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western blot鉴定其免疫原性。结果用PCR方法扩增的hpaA基因长度为783bp,编码260个氨基酸,经酶切鉴定和测序,插入到克隆载体的基因片段与预期目的DNA片段相一致;SDS-PAGE结果显示表达产物相对分子质量约为29kDa,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的26%。结论本研究成功构建了hpaA基因与麦芽糖结合蛋白基因融合原核表达系统,为幽门螺杆菌基因工程组分疫苗的研究奠定基础。

关 键 词:幽门螺杆菌  粘附素基因  克隆  融合表达
文章编号:1002-2694(2007)03-0274-04
修稿时间:2006-06-062006-11-17

Cloning, fusion expression and identification of the adhesion gene hpaA from Helicobacter pylori
HUANG Xue-yong,DUAN Guang-cai,FAN Qing-tang,XI Yuan-lin,HUANG Zhi-gang,SONG Chun-hua. Cloning, fusion expression and identification of the adhesion gene hpaA from Helicobacter pylori[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2007, 23(3): 274-277,281
Authors:HUANG Xue-yong  DUAN Guang-cai  FAN Qing-tang  XI Yuan-lin  HUANG Zhi-gang  SONG Chun-hua
Affiliation:Department of Epidemiology , College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052,China
Abstract:
Keywords:Helicobacter pylori  hpaA gene  cloning  fusion expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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