| 利用Gateway克隆技术构建丹参SmNAC1转录因子的RNAi表达载体 |
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| 引用本文： | 赵容,荣齐仙,刘玉忠,申业,黄璐琦. 利用Gateway克隆技术构建丹参SmNAC1转录因子的RNAi表达载体[J]. 中国中药杂志, 2014, 39(9): 1569-1573 |
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| 作者姓名： | 赵容 荣齐仙 刘玉忠 申业 黄璐琦 |
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| 作者单位： | 黑龙江中医药大学, 黑龙江 哈尔滨 150040;中国中医科学院 中药资源中心, 北京 100700;中国中医科学院 中药资源中心, 北京 100700;中国中医科学院 中药资源中心, 北京 100700;中国中医科学院 中药资源中心, 北京 100700;中国中医科学院 中药资源中心, 北京 100700 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（81173490，81130070） |
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| 摘 要： | NAC转录因子参与植物生长发育和对生物和非生物胁迫的应答反应,利用Gateway克隆技术构建丹参NAC转录因子的RNAi植物表达载体,以便进一步研究丹参NAC转录因子的功能。根据Gateway技术要求,设计含有attB接头的引物,使用NEB的Phusion超保真聚合酶,通过PCR方法,扩增SmNAC1基因的特异性片段。通过BP重组反应,将带有attB接头的PCR产物克隆到入门载体pENTR/SD/D-TOPO上,再通过LR重组反应,利用入门载体上的SmNACi特异性基因片断克隆到植物表达载体pK7GWIWG2D上。实验结果表明Gateway载体的构建方法能够高效、快速地将目的基因克隆到表达载体上,为植物基因转化提供基础。
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| 关 键 词： | RNAi Gateway载体 BP和LR反应 |
| 收稿时间： | 2014-01-26 |
Construction of RNAi vectors for SmNAC1 transcription factors of Salvia miltiorrhiza using Gateway cloning technology |
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| ZHAO Rong,RONG Qi-xian,LIU Yu-zhong,SHEN Ye and HUANG Lu-qi. Construction of RNAi vectors for SmNAC1 transcription factors of Salvia miltiorrhiza using Gateway cloning technology[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2014, 39(9): 1569-1573 |
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| Authors: | ZHAO Rong RONG Qi-xian LIU Yu-zhong SHEN Ye HUANG Lu-qi |
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| Affiliation: | Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China;Natinal Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Scinences, Beijing 100700, China;Natinal Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Scinences, Beijing 100700, China;Natinal Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Scinences, Beijing 100700, China;Natinal Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Scinences, Beijing 100700, China;Natinal Resource Center for Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Scinences, Beijing 100700, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNAi Gateway vectors BP and LR reactions |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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