| 乙型肝炎病毒X基因真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 李晓斐.乙型肝炎病毒X基因真核表达载体的构建[J].检验医学,2012,27(11):921-924. |
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| 作者姓名： | 李晓斐 |
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| 作者单位： | 李晓斐 (青岛市传染病医院检验科,山东青岛,266033)； |
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| 摘 要： | 目的构建含有乙型肝炎病毒(HBV)X基因的真核表达载体,并对其表达进行鉴定。方法用聚合酶链反应(PCR)方法扩增X基因序列,对pcDNA6(+)载体及X基因PCR产物双酶切并转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定,构建HBV X基因真核表达载体pcDNA6(+)-HBx。以多聚乙烯酰胺(PEI)法将其转染到HepG2细胞,Western Blot鉴定目的蛋白。结果 pcDNA6-HBx酶切后,琼脂糖电泳可见到HBx基因片段,经序列测定其含有完整的X基因片段;Western Blot结果显示pcDNA6(+)-HBx能在HepG2细胞中表达X蛋白。结论成功构建了真核表达载体pcDNA6(+)-HBx,并能在HepG2细胞中表达X蛋白,为进一步研究HBV X基因与慢性乙型肝炎及肝癌的关系提供便利条件。
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 X基因 真核表达 |
Establishment of hepatitis B virus X gene eukaryotic expression vector |
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| LI Xiaofei.Establishment of hepatitis B virus X gene eukaryotic expression vector[J].Laboratory Medicine,2012,27(11):921-924. |
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| Authors: | LI Xiaofei |
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| Institution: | LI Xiaofei.(Department of Clinical Laboratory,Qingdao Infection Diseases Hospital,Shandong Qingdao 266033,China) |
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