海马胆碱能神经刺激肽通过活化3型毒蕈碱受体促进INS-1细胞胰岛素释放

摘要：目的明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS-1细胞胰岛素分泌影响，并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进
行分析。方法INS-1细胞随机分为3组：对照组、HCNP组、HCNP+佛波酯（PMA）组。对照组给予RPMI 1640液培养，HCNP组
给予人工合成HCNP（50 pg/ml）与RPMI 1640液共培养，HCNP+PMA组予人工合成HCNP与RPMI 1640液共培养后，行胰岛素
释放前18 h加入PMA（10 nmol/L）；应用放射免疫方法检测各组不同浓度葡萄糖培养液中胰岛素含量。实时定量PCR检测对
照组、HCNP 组HCNP 前体蛋白（HCNP-pp）、胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase, ChAT）、3 型毒蕈碱样受体（3-type
muscarinic receptor, M3R）基因水平表达情况。结果浓度为3.3 mmol/L 葡萄糖，三组间胰岛素含量无明显差异。浓度为5.6
mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖作用下，HCNP组胰岛素含量均高于对照、HCNP+PMA组，差异具有统计学意义。HCNP组INS-1
细胞HCNP-pp、ChAT、M3R三者mRNA含量均高于对照组，差异具有统计学意义。结论HCNP通过提高ChAT活性，推测影响
乙酰胆碱合成，进一步活化M3R，促进胰岛素分泌，PMA可阻断此作用。