临床分离肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及基因相关性研究

目的研究肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及其与luxS、oqxB、rarA等基因的相关性。方法通过96孔板结晶紫染色法测定200株对亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星和庆大霉素敏感的肺炎克雷伯菌（敏感组）和300株对上述药物耐药的肺炎克雷伯菌（耐药组）体外生物膜形成能力；采用扫描电镜观察不同生物膜形成能力肺炎克雷伯菌的生物膜形态特点；通过实时荧光定量PCR分析生物膜形成相关基因（luxS、oqxB、rarA、acrB、ramA、ompK36和micF）表达量。结果强生物膜形成能力组的平均生物膜形成量是弱形成能力组的16.8倍，敏感组和耐药组肺炎克雷伯菌生物膜OD590的平均值分别为0.783±0.642和0.672±0.534，差异无统计学意义；扫描电镜显示生物膜形成能力强的菌株团块内包含大量的生物膜，形态完整且细菌密集排列；强生物膜形成能力组中luxS表达水平分别为中等和弱形成能力组的5.98倍和3.37倍；外排泵、外膜蛋白编码基因及其调控基因的表达水平有统计学差异。结论肺炎克雷伯菌生物膜形成能力与luxS基因的表达量有关，luxS作为一个高阶调控基因，其与ramA、ompK36和micF等基因构成错综复杂的关系网，共同影响生物膜的形成。