激动核受体RXR对大鼠心肌细胞饥饿损伤中自噬和凋亡的双重调控作用

目的探讨激动维甲类X受体(RXR)对大鼠心肌细胞无糖无血清（SGD）饥饿状态下的调控作用及其机制。方法将大鼠心肌细胞株H9c2置于无糖DMEM中培养6h，建立饥饿模型。用9-顺式维甲酸（c-RA）为RXR激动剂，HX531为RXR拮抗剂，并将细胞实验按以下分组：对照组（C组）、SGD干预组（SGD组）、SGD+100nmol/Lc-RA干预组（RA组）、SGD+100nmol/Lc-RA+2.5滋mol/LHX531干预组（HX组），MTT法检测细胞活性，流式细胞法检测细胞凋亡比例及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase）-3活力，Westernblot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及下游活性片段Caspase-9蛋白表达，以及自噬相关蛋白LC3、Beclin1表达，透射电镜检测心肌细胞自噬小体。结果与C组比较，SGD组和HX组心肌细胞活力均下降，凋亡百分比、Bax/Bcl-2比值和Caspase-9蛋白水平均上升（均P＜0.01）；与SGD组比较，RA组心肌细胞活力均上升，凋亡百分比、Bax/Bcl-2比值和Caspase-9蛋白水平均下降（均P＜0.01）。SGD组平均荧光强度（MFI）波峰明显右移，为C组的2.3倍（P＜0.01）；而RA波峰出现明显左移，MFI值仅为C组的1.3倍，明显低于SGD组（P＜0.01）；HX组波峰与SGD组相似，MFI值显著高于C组（P＜0.01）。透射电镜下观察到C组中细胞质内细胞器完整，而SGD组和HX组自噬小体数增加，内含有被吞噬的线粒体等结构，部分呈空泡样改变，同时自噬相关蛋白LC3-II/I比值上升，Beclin1表达增加（均P＜0.01）；RA组心肌细胞自噬小体数量明显减少，LC3-II/I比值下调，Beclin1蛋白表达水平降低（均P＜0.01）。结论激动核受体RXR可以保护心肌细胞SGD状态下的损伤，其机制与对凋亡和自噬通路的双重调控作用有关。