黄连素对脂多糖诱导人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用研究

目的探讨黄连素（BBR）对脂多糖（LPS）诱导的人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）损伤的保护作用及其机制。方法体外培养HUVECs，分为正常对照组(Control组)、LPS组、LPS+细胞自噬诱导剂雷帕霉素（RAPA）组、LPS+细胞自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）组和LPS+BBR组，置于含相关药物的培养基中继续培养。采用EdU染色法检测细胞活性变化，荧光显微镜观察自噬流变化，Westernblot法检测自噬相关蛋白p62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平变化。结果与Control组比较，LPS组EdU染色阳性细胞率明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；与LPS组比较，LPS+RAPA组EdU染色阳性细胞率明显下降，而LPS+3-MA组EdU染色阳性细胞率明显上升，LPS+BBR组EdU染色阳性细胞率明显上升，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与Control组比较，LPS组自噬小体和自噬溶酶体数量均增加，p62和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平均上升（均P＜0.05）；与LPS组比较，BBR组自噬小体和自噬溶酶体数量均减少，p62和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平均下降（均P＜0.05）。结论LPS诱导HUVECs产生自噬，BBR通过抑制由LPS诱导产生的自噬来减轻LPS诱导的HUVECs损伤。