FoxO1在高糖诱导小鼠胰岛β细胞去分化中的作用机制研究

目的探讨FoxO1在高糖培养诱导小鼠胰岛β细胞去分化中的作用机制。方法将小鼠胰岛β细胞MIN-6细胞分为4组：常规糖浓度组（葡萄糖浓度25mmol/L）、高张浓度组（葡萄糖浓度25mmol/L+甘露醇35mmol/L）、高糖浓度组（葡萄糖浓度60mmol/L）、高糖浓度+FoxO1磷酸化酶抑制剂渥曼青霉素干预组（葡萄糖浓度60mmol/L+渥曼青霉素50nmol/L）。采用Westernblot法检测磷酸化FoxO1（p-FoxO1）（位点：256、319）、FoxO1、前β细胞标志物八聚体转录因子4（Oct4）、β细胞标志物胰腺十二指肠同源盒-1（PDX1）蛋白表达水平；qRT-PCR法检测FoxO1mRNA表达水平。结果在一定时间范围内，高糖能刺激MIN-6细胞FoxO1256及319位点磷酸化；高糖培养后，MIN-6细胞内FoxO1mRNA和蛋白水平无明显变化；高糖培养后，MIN-6细胞Oct4蛋白表达水平升高，PDX1蛋白表达水平降低，表明MIN-6细胞去分化；用渥曼青霉素干预后，MIN-6细胞Oct4蛋白表达水平降低，PDX1蛋白表达水平升高。结论高糖可能通过FoxO1256和319位点磷酸化而参与诱导体外培养小鼠胰岛β细胞发生去分化。