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真武汤HPLC-ELSD指纹图谱及13种成分含量测定研究
作者姓名:田萍  位恒超  韩德恩  经天宇  马开
作者单位:河南省中医药研究院, 河南 郑州 450004;河南中医药大学药学院, 河南 郑州 450046
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81473368);河南省中医药科学研究专项课题(2016ZY2020);河南省中医药科学研究专项课题(2017 ZY2036)
摘    要:目的 建立真武汤HPLC-ELSD指纹图谱,采用化学模式识别法对其进行分析和筛选出真武汤的标志性成分,并以其为指标建立真武汤含量测定方法。方法 采用HPLC-ELSD法建立16批真武汤指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行相似度评价,确定共有峰及其归属,运用聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),筛选出真武汤的指标性成分。结果 建立了真武汤指纹图谱,确认了38个共有峰,相似度均>0.95;CA、PCA、OPLS-DA结果一致,将样品分为3类;不同批次真武汤样品差异贡献较大的指标成分指认了11个,即苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、猪苓酸C、茯苓酸、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、羟基芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷;6-姜酚、6-姜烯酚为生姜主要活性成分,故将以上13个成分作为真武汤指标性成分,各色谱峰分离度较好,线性关系良好,平均加样回收率为96.46%~99.80%,RSD≤3.15%;16批次样品中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、猪苓酸C、茯苓酸、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、羟基芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、6-姜酚、6-姜烯酚的质量分数分别为283.93~576.86、25.05~147.39、62.96~303.37、31.24~131.27、9.76~44.04、32.15~83.55、76.55~333.13、17.48~146.61、456.58~1554.14、3 322.48~5 590.01、158.21~556.50、525.85~582.92、68.52~74.73 mg/g。结论 指纹图谱与PCA、CA、OPLS-DA相结合可全面地评价真武汤质量,该方法稳定、可靠,为真武汤质量评价提供参考。

关 键 词:真武汤  HPLC-ELSD  指纹图谱  化学模式识别  相似度  聚类分析  主成分分析  正交偏最小二乘法判别分析  苯甲酰新乌头原碱  苯甲酰乌头原碱  苯甲酰次乌头原碱  猪苓酸C  茯苓酸  白术内酯II  白术内酯III  羟基芍药苷  芍药内酯苷  芍药苷  苯甲酰芍药苷  6-姜酚  6-姜烯酚
收稿时间:2020-06-24
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