甲氧基黄酮促斑马鱼黑色素生成的药效学评价及机制研究

目的 基于药性理论，通过对临床医保目录中抗白癜风中成药方药活性成分的筛选，对其有效成分进行初步药效学评价及机制探讨。方法 收集抗白癜风中成药组方、药性和物质基础以筛选主药。通过TCMSP和TCMIP数据库得到主要化合物类型。使用admetSAR分析成药性得出关键化合物。通过成年斑马鱼和斑马鱼幼鱼的形态学、黑色素含量测定观察体内药效学。通过斑马鱼幼鱼存活率进行安全性评价。通过RT-PCR显示化合物在转录水平中的作用机制。使用分子对接预测化合物与蛋白晶体结构的结合能力。结果 使用频次最高的主药为红花、紫草、蒺藜、龙胆、补骨脂和驱虫斑鸠菊。通过TCMSP和TCMIP数据库得到主要化合物类型为黄酮类，共有81个。根据成药性和稳定性筛选出甲氧基黄酮类化合物山柰素和异鼠李素。32 μmol/L山柰素、32 μmol/L异鼠李素和25 μmol/L甲氧沙林均能促进斑马鱼黑色素再生。基于斑马鱼胚胎模型，3个化合物均能加速胚胎黑色素生成，且其有效浓度下斑马鱼幼鱼的存活率在90%以上。RT-PCR结果显示山柰素与异鼠李素上调黑色素生成关键基因黑素皮质素1受体（MCIR）和小眼畸形相关转录因子（MITF）mRNA水平。分子对接结果显示山柰素、异鼠李素与底物酶结合分数高于甲氧沙林。结论 临床抗白癜风中成药组方中活性成分山柰素与异鼠李素促进斑马鱼模型黑色素生成且通过上调MC1R/MITF信号通路作用。

Pharmacodynamic evaluation and mechanism of methoxyflavone to promote melanin production in zebrafish