哈巴俄苷通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻神经炎症诱导的神经元损伤

目的 研究哈巴俄苷对神经炎症诱导神经元损伤的作用。方法 采用MTT检测血管紧张素II（angiotensin II，Ang II）和哈巴俄苷对小鼠小胶质BV2细胞活性的影响；观察BV2细胞的形态变化；检测细胞上清液中炎症因子水平；采用免疫荧光检测核因子-κB p65（nuclear factor-κB p65，NF-κB p65）核易位以及CD86、髓系细胞触发受体2（triggering receptor expressed on myeloid cells 2，TREM2）的表达；采用Western blotting检测Toll样受体4（Toll like receptor 4，TLR4）、髓样分化因子88（molecule myeloid differentiation factor 88，MyD88）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）蛋白表达。分别使用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）和TLR4抑制剂（TAK-242）进一步验证哈巴俄苷的作用机制。建立BV2-HT22细胞共培养模型，检测线粒体膜电位、细胞凋亡情况以及凋亡相关蛋白表达，研究哈巴俄苷对神经炎症引起的神经元损伤的影响。结果 Ang II显著上调BV2细胞TLR4、MyD88、IL-1β、TNF-α和iNOS蛋白表达（P＜0.01、0.001），促进NF-κB p65入核（P＜0.001），调节小胶质细胞表面炎症标志物CD86和TREM2的表达（P＜0.05）。哈巴俄苷和TAK-242可逆转Ang II或LPS诱导的BV2细胞的作用（P＜0.05、0.01、0.001）。此外，哈巴俄苷可显著下调BV2-HT22共培养模型HT22细胞中凋亡相关蛋白的表达（P＜0.01、0.001），抑制HT22细胞凋亡（P＜0.05、0.001）。结论 哈巴俄苷可能通过抑制Ang II诱导的BV2细胞TLR4/MyD88/ NF-κB通路的激活来减轻炎症反应，进而缓解炎症引起的神经元细胞的凋亡。