RNA m6A甲基化修饰在脂肪细胞胰岛素抵抗中的作用机制

目的 探讨RNA m⁶A甲基化修饰在脂肪细胞胰岛素抵抗中的作用及机制。方法 收集2型糖尿病患者术中赘余皮下脂肪组织，以非2型糖尿病患者同样组织为对照，检测组间RNA m⁶A水平。高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠构建胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）模型（HFD组，n=5，60%高脂饲料喂养16周），对照组10%低脂饲料喂养16周（CD组，n=5）。模型构建成功后，取附睾周围脂肪组织行表观转录组学m⁶A甲基化修饰芯片检测，并借助MeRIP-qPCR实验、RT-qPCR以及RNA结合蛋白免疫沉淀测定（RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay，RIP）实验验证胰岛素信号转导相关基因变化；进一步观察METTL3小分子抑制剂STM2457对高脂饮食诱导下小鼠胰岛素信号转导基因的影响。结果 2型糖尿病患者和小鼠IR模型脂肪组织中总体m⁶A修饰水平均升高（患者200 ng RNA t=-8.375，P<0.001；患者100 ng RNA t=-3.722，P=0.006；患者50 ng RNA t=-4.937；P=0.001；小鼠100 ng RNA t=-3.590，P=0.023；小鼠50 ng RNA t=-2.760，P=0.025）。表观转录组学检测证实IR的脂肪组织中1 175个基因发生高m⁶A修饰，55个基因发生低m⁶A修饰，同时有182个基因呈现高m⁶A修饰且低表达，包括AKT2、INSR、PIK3R1、ACACA、SREBF1等5个胰岛素信号转导关键基因，其中AKT2、INSR、ACACA、SREBF1等4个基因被确证并证实其与METTL3存在直接结合，其m⁶A修饰水平受METTL3正向调控。STM2457作用下，胰岛素敏感性提高，且AKT2、INSR、ACACA、SREBF1转录水平上调，提示IR表型改善明显。结论 高脂饮食通过METTL3诱导脂肪细胞胰岛素信号转导基因AKT2、INSR、ACACA、SREBF1发生m⁶A高甲基化修饰，诱导其低表达，阻滞胰岛素信号转导，进而参与诱发IR。

The role of RNA m6A methylation in insulin resistance in adipocytes