| 弓形虫表面抗原SAG1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 都建,沈继龙,汪学龙,王维. 弓形虫表面抗原SAG1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J]. 临床输血与检验, 2004, 6(1): 4-7 |
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| 作者姓名： | 都建 沈继龙 汪学龙 王维 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学病原生物学教研室,安徽省基因研究重点实验室,230032,合肥;安徽医科大学病原生物学教研室,安徽省基因研究重点实验室,230032,合肥;安徽医科大学病原生物学教研室,安徽省基因研究重点实验室,230032,合肥;安徽医科大学病原生物学教研室,安徽省基因研究重点实验室,230032,合肥 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学基金资助 (编号 :9843 63 2 9,0 0 44 5 47) |
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| 摘 要： | 目的 体外扩增弓形虫RH株膜表面抗原SAG1编码基因，构建原核表达质粒，并表达SAG1编码基因序列。方法 收集、纯化RH株速殖子，提取RNA，据已知的SAG1基因序列，在设计合成的1对引物中引入EcoRI和HindⅢ酶切位点。应用RT—PCR技术，扩增SAG1基因片段，插入原核表达质粒pET28a中，转化大肠杆菌BL21感受态细胞，重组子经EcoRI和HindⅢ双酶切、PCR鉴定，转化宿主菌BL21，并以IPTG诱导表达。结果 从弓形虫RH株RNA中扩增出1011bp的SAG1基因片段，构建重组质粒pET28a／SAG1，酶切和PCR鉴定产物大小均与预期值相符；IPTG诱导，SDS—PAGE显示表达产物的大小约34．8kD．结论 成功地从弓形虫RH株RNA中获取SAG1基因，构建了pET28a／SAG1重组质粒并获得了高效表达，为免疫学诊断和蛋白质疫苗的研究创造了条件。
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| 关 键 词： | 弓形虫 膜表面抗原 基因克隆与表达 |
| 文章编号： | 1671-2587(2004)01-0004-04 |
| 修稿时间： | 2003-10-18 |
Molecular cloning and expresssion of T.gondii surface antigen SAG1 gene in E.coli |
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| DU Jian,SHEN Jilong,WANG Xuelong,et al.. Molecular cloning and expresssion of T.gondii surface antigen SAG1 gene in E.coli[J]. Journal of Clinical Transfusion and Laboratory Medicine, 2004, 6(1): 4-7 |
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| Authors: | DU Jian SHEN Jilong WANG Xuelong et al. |
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| Affiliation: | DU Jian,SHEN Jilong,WANG Xuelong,et al.Division of Microbiology and Parasitology,Anhui Medical University,Hefei 230032 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Toxoplasma gondii Surface antigen SAG1 Gene cloning expression |
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