| 改变退火温度对甲基特异性PCR检验指标有效性的影响 |
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| 引用本文： | WANG Nannan,王楠楠,李智,于永春,赵敏,段建敏. 改变退火温度对甲基特异性PCR检验指标有效性的影响[J]. 检验医学, 2006, 21(6): 629-632 |
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| 作者姓名： | WANG Nannan 王楠楠 李智 于永春 赵敏 段建敏 |
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| 作者单位： | 同济大学附属第十人民医院检验科,上海,200072;兰州大学第二附属医院泌尿外科,甘肃,兰州,730000 |
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| 摘 要： | 目的探讨政变退火温度对甲基特异性聚合酶链反应PCR检验指标有效性的影响。方法将经测序证实的RASSF1A甲基化标本分别作为完全甲基化（100％M）和完全末甲基化的标本（0％M），按1：3体积比例混合，作梯度PCR扩增，摸索适当的退火温度。选取单一电泳条带的温度为优化的退火温度，并以这些温度检测70例标本[35对，以同一患者的肿瘤组织（K）、癌旁组织（N）为1对]，比较其在各温度情况时的扩增效果。结果以上指标依年龄（70岁以L／70岁以下）不同出现不同的变化趋热；似然比分析数值均介于0．1—10之间；70岁以下组阳性预测值大多〉70岁以上组；若定义64℃以上温度为高温段，63．3℃以下温度为低温段，则低温段70岁以下组阴性预测值〉70岁以上组，高温段70岁以卜组〉70岁以下组。结论与普通PCR类似，甲基特异性PCR可以通过调接退火温度来改变其俭测效能，但温度变化间隔最好不要〈1℃；应用甲基特异性PCR检测RASSF1A甲基化可以作为膀胱肿瘤早期诊断的辅助方法，在较低年龄组的应用价值高于高年龄组，尤其是在排除肿瘤方面。
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| 关 键 词： | DNA甲基化 聚合酶链反应 甲基特异性 预测值 似然比 |
| 文章编号： | 1001-2087(2006)06-0629-04 |
| 修稿时间： | 2006-06-10 |
The influence on clinical values by optimizing the annealing-temperature of methylation specific PCR |
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| WANG Nannan. The influence on clinical values by optimizing the annealing-temperature of methylation specific PCR[J]. Laboratory Medicine, 2006, 21(6): 629-632 |
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| Authors: | WANG Nannan |
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