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高分辨率溶解技术定量检测系统性红斑狼疮患者血细胞中CD70启动子低甲基化水平
引用本文:邵勇,钟绮丽,张杰,杨虹,万峻,胡小平,陈办成,于波. 高分辨率溶解技术定量检测系统性红斑狼疮患者血细胞中CD70启动子低甲基化水平[J]. 实用诊断与治疗杂志, 2010, 24(7)
作者姓名:邵勇  钟绮丽  张杰  杨虹  万峻  胡小平  陈办成  于波
作者单位:1. 北京大学深圳医院皮肤科,广东省深圳市,518036
2. 北京大学深圳医院检验科,广东省深圳市,518036
3. 深圳北京大学香港科技大学医学中心
摘    要:目的:建立高分辨率溶解技术定量检测系统性红斑狼疮患者血细胞中CD70启动子甲基化的方法,探讨CD70甲基化程度与系统性红斑狼疮发病的相关性.方法:319例系统性红斑狼疮患者及323例健康体检者外周血标本,抽提DNA后进行甲基化修饰.以CpGenome Universal Methylated DNA作为100%甲基化的样本,以100%非甲基化的健康体检者外周血DNA作为稀释剂,分别制成100%,80%,50%,30%,10%,0系列浓度的标准曲线;采用高分辨率溶解技术定量检测CD70甲基化水平.结果:100%,80%,50%,30%,lO%,0甲基化标准品的高分辨率溶解曲线从右向左依次排列,待测样本在标准曲线上的位置即代表了其甲基化程度.高分辨率溶解技术重复性好,可检测低至10%甲基化水平.CD70甲基化水平与系统性红斑狼疮发病显著相关(P=0.00047).结论:建立高分辨率溶解技术定量检测CD70甲基化程度的方法,CD70启动子低甲基化有望成为评估系统性红斑狼疮患病的分子指标.

关 键 词:系统性红斑狼疮  高分辨率溶解技术  低甲基化

Qualitative determination of methylation level of CD70 promoter with high-resolution melting technique in peripheral blood samples from systemic lupus erythematosus
Abstract:
Keywords:CD70
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