富血小板血浆促进骨髓间充质干细胞对大鼠骨缺损的修复作用

目的探讨富血小板血浆(platelet-rich plasma, PRP)对大鼠骨缺损的修复作用。方法提取大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs),获得血小板浓度为2×10~5/L、2×10~6/L和2×10~7/L的PRP,分别将不同浓度的PRP与BMSCs共培养,通过MTT实验观察PRP对BMSCs细胞增殖的影响,ELISA实验检测PRP对BMSCs中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的作用。构建大鼠股骨节段缺损模型,分别使用BMSCs和PRP(血小板2×10~5/L)混合物;BMSCs和PRP(血小板2×10~6/L)混合物;BMSCs和PRP(血小板2×10~6/L)来填补模型中的缺陷部位。8周后处死大鼠,评估缺损修复情况。通过Western Blot和Real-Time PCR检测断端骨组织内BMP-2和Collagen I含量,免疫组织化学染色检测组织内BMP-2含量。结果不同浓度的PRP对BMSCs的增殖和ALP的表达情况均有促进作用,且随血小板浓度的增加而加剧。PRP的添加能够促进大鼠骨缺损模型中的骨再生作用,促进BMP-2和Collagen I的表达,其促进作用具有剂量依赖性。BMSCs单独处理组能够在一定程度上促进骨缺损的修复,但作用较慢。PRP单独应用对骨缺损的修复作用较小。结论 PRP具有促进BMSCs对大鼠骨缺损的修复作用。