| 硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ诱饵质粒的构建和检测 |
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| 引用本文： | 刘萍,宋安萍,马丁.硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ诱饵质粒的构建和检测[J].华中医学杂志,2007,31(6):467-469. |
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| 作者姓名： | 刘萍 宋安萍 马丁 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的 构建硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ(PrxⅡ)诱饵质粒,同时检测其在酵母菌内的表达和对酵母细胞的毒性.方法 提取人前列腺癌细胞系PC-3M-1E8细胞的RNA,利用RT-PCR获得其cDNA, PCR方法扩增PrxⅡ基因片段,纯化后以内切酶双酶切PrxⅡ和酵母表达载体pGBKT7,回收产物并连接,重组质粒命名为pGBKT7-PrxⅡ, 将重组质粒导入酵母菌AH109,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用.结果 构建的诱饵载体pGBKT7-PrxⅡ测序结果表明序列完全正确,融合区域的读码框正确.将pGBKT7-PrxⅡ成功转化入酵母感受态AH109,并证明PrxⅡ蛋白对酵母无毒性作用.结论 证实了PrxⅡ蛋白无酵母毒性,诱饵质粒pGBKT7-PrxⅡ可以用于酵母双杂交研究前列腺癌发病机制.
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| 关 键 词： | 硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ 酵母双杂交系统 诱饵质粒 硫氧还蛋白 过氧化物酶 诱饵质粒 检测 peroxiredoxin plasmids bait yeast verification Construction 发病机制 前列腺癌 研究 酵母双杂交 感受态 转化 框正 读码 融合区域 完全 |
| 修稿时间： | 2007年8月2日 |
Construction and verification of yeast bait plasmids carrying peroxiredoxin Ⅱ cDNA fragment |
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| Liu Ping,Song Anping,Ma Ding.Construction and verification of yeast bait plasmids carrying peroxiredoxin Ⅱ cDNA fragment[J].Central China Medical Journal,2007,31(6):467-469. |
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| Authors: | Liu Ping Song Anping Ma Ding |
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