IP-RPHPLC法检测电针后肥胖大鼠肝脏组织中ATP、ADP和AMP含量

目的 建立一种离子对反相高效液相色谱(IP-RPHPLC)法并将其用于检测电针对肥胖大鼠肝脏组织中ATP、ADP和AMP含量的影响。方法 应用岛津SIL-20AT高效液相色谱系统，Megres-C₁₈(5μm，250mm×4.6mm)耐水性色谱柱，对大鼠肝脏组织中ATP、ADP和AMP进行分离，流动相为0.18mol/L的磷酸二氢钾缓冲液(含5%甲醇且pH=6.25)，检测波长为254nm，流速为0.8mL/min，进样体积为20μL，柱温为25℃。结果 ATP在1.1~212.2μg/mL(r=0.9999)，ADP在0.9~180.0μg/mL(r=0.9999)及AMP在0.9~181.8μg/mL(r=0.9997)范围内线性关系良好。ATP、ADP和AMP平均回收率分别为96.4%、98.3%、100.8%；RSD分别为2.50%、2.88%、4.14%；日内和日间精密度RSD分别为0.06%~0.40%和0.06%~0.69%；准确度均在99.0%~108.6%之间；ATP、ADP和AMP检测限为0.11、0.09、0.045μg/mL。结论 建立的高效液相色谱法用于检测大鼠肝脏组织中ATP、ADP和AMP含量简便、快速并且准确可靠，为针刺干预治疗后组织中小分子生物活性物质浓度的检测等研究工作奠定了基础。