| 限制性显示技术在制备丙型肝炎病毒分型芯片探针的应用性研究 |
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| 引用本文： | 孙朝晖,郑文岭,彭翼飞,张宝,马文丽.限制性显示技术在制备丙型肝炎病毒分型芯片探针的应用性研究[J].肝脏,2004,9(1):15-17. |
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| 作者姓名： | 孙朝晖 郑文岭 彭翼飞 张宝 马文丽 |
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| 作者单位： | 510010,广州军区广州总医院肿瘤分子生物学研究所;第一军医大学分子生物学研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (No .39880 0 32 )，广州市重点科技攻关项目 (No.99 Z 0 2 2 0 1 ) |
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| 摘 要： | 目的：探讨限制性显示(restrictuion display,RD)技术在制备丙型肝炎病毒(HCV)分型芯片探针的可行性。方法:用限制性内切酶Sau3A I消化HCV1a、1b、2a亚型全长cDNA，所得的限制性内切酶片段与通用接头相连，通过10个选择性引物进行分组PCR，使得各片段得以扩增并分布于10个亚组中，经聚丙烯酰胺电泳(PAGE)结合银染法进行分离。切胶回收后作3次PCR，得到较纯净的HCV cDNA限制性片段。对这些片段做分子克隆，并测序鉴定。结果:由HCV 3个亚型1a、2a、1b的全长cDNA得到66个大小相对均一(200～900bp)的限制性片段，平均每个亚型约22个。测序结果表明，属于HCV基因，可以作为HCV分型芯片的探针。结论:RD技术能快速收集大量长度适宜、大小均一的病毒基因片段，适合于分型诊断基因芯片探针的收集。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 限制性显示 基因芯片 分子探针 |
| 修稿时间： | 2004年1月5日 |
Application of restriction display technique in the preparation of the HCV probes for the preparation HCV microarray |
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| SUN Zhaohui,ZHENG Wenling,PENG Yifei,et al..Application of restriction display technique in the preparation of the HCV probes for the preparation HCV microarray[J].Chinese Hepatology,2004,9(1):15-17. |
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| Authors: | SUN Zhaohui ZHENG Wenling PENG Yifei |
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| Institution: | SUN Zhaohui,ZHENG Wenling,PENG Yifei,et al. Institute of Molecular Oncology,Liu Hua Qiao Hospital Guangzhou 510010,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis C virus Restriction display Microarray Gene probes |
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