| 组织因子途径抑制因子重组蛋白表达和纯化方法的优化 |
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| 引用本文： | 韩彦峰,刘兰霞,宋丽萍,董霞,张海玲,冷希岗. 组织因子途径抑制因子重组蛋白表达和纯化方法的优化[J]. 天津医药, 2009, 37(1) |
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| 作者姓名： | 韩彦峰 刘兰霞 宋丽萍 董霞 张海玲 冷希岗 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院、北京协和医学院生物医学工程所,300192 |
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| 基金项目： | 天津市科技攻关培育项目 |
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| 摘 要： | 目的:对组织因子途径抑制因子(TFPI)的表达条件和纯化方法进行优化,降低重组蛋白制备成本.方法:应用巴斯德毕赤酵母表达系统进行TFPI重组蛋白的表达.采用不同浓度甲醇进行重组蛋白表达诱导,观察不同pH对重组蛋白活性的影响,应用硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析相结合的方法纯化重组蛋白.结果:重组蛋白的表达量达到1.5 mg/L培养基.上述蛋白纯化方法所得回收率为43.1%,蛋白纯度大于95%,蛋白活性保持良好.结论:优化后的蛋白表达量比优化前得到明显提高,本研究采用的纯化方法操作简单、耗时短、成本低且回收率较高.
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| 关 键 词： | 凝血致活酶 重组蛋白质类 毕赤酵母 甲醇 氢离子浓度 |
Optimization of Expression Conditions for Purification of Recombinant Tissue Factor Pathway Inhibitors |
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| HAN Yanfeng,LIU Lanxia,SONG Liping,DONG Xia,ZHANG Hailing,LENG Xigang. Optimization of Expression Conditions for Purification of Recombinant Tissue Factor Pathway Inhibitors[J]. Tianjin Medical Journal, 2009, 37(1) |
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| Authors: | HAN Yanfeng LIU Lanxia SONG Liping DONG Xia ZHANG Hailing LENG Xigang |
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