| 精氨琥珀酸裂解酶上调乙型肝炎病毒表面抗原启动子Ⅰ的研究 |
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| 引用本文： | 杨瑗,洪源,成军,赵英仁.精氨琥珀酸裂解酶上调乙型肝炎病毒表面抗原启动子Ⅰ的研究[J].胃肠病学和肝病学杂志,2005,14(1):8-10. |
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| 作者姓名： | 杨瑗 洪源 成军 赵英仁 |
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| 作者单位： | 100039,北京,解放军第302医院传染病研究所治疗研究中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (No.C39970 674,No.C0 30 1 1 4 0 2 ,No .C3990 0 1 30 ,No .C30 0 70 689) |
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| 摘 要： | 目的了解精氨琥珀酸裂解酶(ASL)与乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原启动子-Ⅰ(SpⅠ)的关系，研究精氨琥珀酸裂解酶与SPⅠ在HBV致病的分子生物学机制中的作用。方法应用聚合酶链反应(PCR)扩增精氨琥珀酸裂解酶编码基因。以T-A克隆法，将ASL基因片段连人载体pGEM—T。将获得的质粒pGEM-T-ASL，与报告质粒pcDNA3．1(-)分别用KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后构建ASL表达载体pcDNA3．1(-)-ASL，将重组表达载体pcDNA3．1(-)-ASL和pCAT3-SpⅠ瞬时转染HepG2细胞，同时转染pCAT3-basic入HepG2细胞，作为阴性对照，48h后收获细胞。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性，以了解ASL对SpⅠ转录活性的调节作用。结果构建的真核表达载体pcDNA3．1(-)-ASL经过酶切鉴定和测序证实正确。在真核表达载体pcDNA3．1(-)-ASL和pCAT3-SpⅠ共转染的HepG2细胞中，CAT表达活性是CAT3空载体的3．3倍，是pCAT3-SpⅠ的1．45倍。结论精氨琥珀酸裂解酶可以上调SpⅠ启动子的活性，促进表面抗原基因的表达。
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| 关 键 词： | 裂解酶 HepG2细胞 pcDNA3 琥珀酸 上调 乙型肝炎病毒表面抗原 启动子 表达活性 酶切 表达载体 |
| 文章编号： | 1006-5709(2005)01-0008-03 |
| 修稿时间： | 2004年4月22日 |
Study on the up-regulation effects of argininosuceinate lyase on HBV surface antigen promoter Ⅰ activity |
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| YANG Yuan,Hong Yuan,CHENG Jun,ZHAO Yingren.Study on the up-regulation effects of argininosuceinate lyase on HBV surface antigen promoter Ⅰ activity[J].Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology,2005,14(1):8-10. |
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| Authors: | YANG Yuan Hong Yuan CHENG Jun ZHAO Yingren |
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| Institution: | YANG Yuan,HONG Yuan,CHENG Jun,ZHAO YingrenGene Therapy Research Center,Institute of Infectious Disease,The 302 Hospital of PLA,Beijing 100039,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Argininosuccinate lyase Surface-antigen promoter I Up-regulation |
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