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精氨琥珀酸裂解酶上调乙型肝炎病毒表面抗原启动子Ⅰ的研究
引用本文:杨瑗,洪源,成军,赵英仁. 精氨琥珀酸裂解酶上调乙型肝炎病毒表面抗原启动子Ⅰ的研究[J]. 胃肠病学和肝病学杂志, 2005, 14(1): 8-10
作者姓名:杨瑗  洪源  成军  赵英仁
作者单位:100039,北京,解放军第302医院传染病研究所治疗研究中心
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (No.C39970 674,No.C0 30 1 1 4 0 2 ,No .C3990 0 1 30 ,No .C30 0 70 689)
摘    要:目的了解精氨琥珀酸裂解酶(ASL)与乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原启动子-Ⅰ(SpⅠ)的关系,研究精氨琥珀酸裂解酶与SPⅠ在HBV致病的分子生物学机制中的作用。方法应用聚合酶链反应(PCR)扩增精氨琥珀酸裂解酶编码基因。以T-A克隆法,将ASL基因片段连人载体pGEM—T。将获得的质粒pGEM-T-ASL,与报告质粒pcDNA3.1(-)分别用KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后构建ASL表达载体pcDNA3.1(-)-ASL,将重组表达载体pcDNA3.1(-)-ASL和pCAT3-SpⅠ瞬时转染HepG2细胞,同时转染pCAT3-basic入HepG2细胞,作为阴性对照,48h后收获细胞。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性,以了解ASL对SpⅠ转录活性的调节作用。结果构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)-ASL经过酶切鉴定和测序证实正确。在真核表达载体pcDNA3.1(-)-ASL和pCAT3-SpⅠ共转染的HepG2细胞中,CAT表达活性是CAT3空载体的3.3倍,是pCAT3-SpⅠ的1.45倍。结论精氨琥珀酸裂解酶可以上调SpⅠ启动子的活性,促进表面抗原基因的表达。

关 键 词:裂解酶 HepG2细胞 pcDNA3 琥珀酸 上调 乙型肝炎病毒表面抗原 启动子 表达活性 酶切 表达载体
文章编号:1006-5709(2005)01-0008-03
修稿时间:2004-04-22

Study on the up-regulation effects of argininosuceinate lyase on HBV surface antigen promoter Ⅰ activity
YANG Yuan,Hong Yuan,CHENG Jun,ZHAO Yingren. Study on the up-regulation effects of argininosuceinate lyase on HBV surface antigen promoter Ⅰ activity[J]. Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology, 2005, 14(1): 8-10
Authors:YANG Yuan  Hong Yuan  CHENG Jun  ZHAO Yingren
Affiliation:YANG Yuan,HONG Yuan,CHENG Jun,ZHAO YingrenGene Therapy Research Center,Institute of Infectious Disease,The 302 Hospital of PLA,Beijing 100039,China
Abstract:
Keywords:Argininosuccinate lyase  Surface-antigen promoter I  Up-regulation
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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