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胎儿骨髓间充质干细胞在体外无支架下向软骨组织分化的探讨
引用本文:洪嵩,安荣泽,廖文波. 胎儿骨髓间充质干细胞在体外无支架下向软骨组织分化的探讨[J]. 遵义医学院学报, 2003, 26(3): 221-225
作者姓名:洪嵩  安荣泽  廖文波
作者单位:遵义医学院附属医院,骨科,贵州,遵义,563003
摘    要:目的 探讨骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCs)无支架条件下在体外向软骨组织定向分化的条件。方法 取引产胎儿骨髓悬液 ,经Percoll密度梯度离心 ,获取单个核细胞 ,细胞贴壁、扩增后 ,再以高糖DMEM(TGF β15ng/ml)进行成软骨细胞预诱导 ,4~ 7d后获得成纤维样单层贴壁的MSCs。以此MSCs为种子细胞 ,2× 10 6个细胞离心成团 ,在TGF β1与IGF Ⅰ及其它辅助成分的协同作用下 ,体外培养 3wk后形成组织团块。经固定、包埋、切片后行甲苯氨蓝染色 ,免疫组化方法测定特异性Ⅱ型胶原。通过图象分析软件检测组织块蛋白多糖和Ⅱ型胶原表达强度 ,并与胎儿正常软骨比较。结果 胎儿骨髓单个核细胞经过预诱导 ,细胞表达特异性Ⅱ型胶原 ,甲苯氨蓝染色蓝染明显增强 ;再经离心成团、体外诱导培养后形成有光泽软骨样组织块 ,其甲苯氨蓝染色呈蓝染 ,特异性Ⅱ型胶原为阳性表达 ,图象分析表明其蛋白多糖及Ⅱ型胶原表达强度与胎儿正常软骨相似。结论 胎儿骨髓间充质干细胞经高糖DMEM预诱导后可向软骨细胞分化 ;离心成团后 ,在TGF β1与IGF Ⅰ及其它辅助成分的协同作用下具有形成类软骨组织的能力 ,本实验建立的定向诱导培养系统在无支架条件下可使MSCs向软骨样组织分化。

关 键 词:骨髓间充质干细胞 软骨 细胞培养 生长因子
文章编号:1000-2715(2003)03-0221-05
修稿时间:2003-04-12

The exploration of chondrocytic differentiation of mesenchymal stem cells without scaffold in virtro
HONG Song ,AN Rong-ze ,LIAO Wen-bo. The exploration of chondrocytic differentiation of mesenchymal stem cells without scaffold in virtro[J]. Acta Academiae Medicine Zunyi, 2003, 26(3): 221-225
Authors:HONG Song   AN Rong-ze   LIAO Wen-bo
Affiliation:HONG Song 1,AN Rong-ze 2,LIAO Wen-bo 3
Abstract:
Keywords:mesenchymal stem cells  cartilage  culcure  growth factor
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