| 基于逆转录-环介导等温扩增技术快速检测发热伴血小板减少综合征病毒方法的建立 |
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| 作者姓名： | 葛以跃 赵康辰 崔仑标 戚宇华 郭喜玲 陈银 焦永军 史智扬 周明浩 |
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| 作者单位： | 葛以跃 (江苏省疾病预防控制中心,卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京210009)； 赵康辰 (江苏省疾病预防控制中心,卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京210009)； 崔仑标 (江苏省疾病预防控制中心,卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京210009)； 戚宇华 (江苏省疾病预防控制中心,卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京210009)； 郭喜玲 (江苏省疾病预防控制中心,卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京210009)； 陈银 (江苏省疾病预防控制中心,卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京210009)； 焦永军 (江苏省疾病预防控制中心,卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京210009)； 史智扬 (江苏省疾病预防控制中心,卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京210009)； 周明浩 (江苏省疾病预防控制中心,卫生部肠道病原微生物重点实验室,南京210009)； |
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| 基金项目： | 十二五科技重大专项计划(项目编号：2013ZX10004103-006,2012ZX10004-210-004)江苏省科技支撑计划(项目编号：BE2011796)江苏省科教兴卫工程(项目编号：RC2011191,JKRC2011001) |
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| 摘 要： | 目的建立1种快速、特异、灵敏的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)的检测方法。方法针对SFTSV M基因保守区域的核酸序列,设计逆转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)特异性引物,优化反应体系和条件。用毛细管电泳法和横向流动试纸条(LFD)法检测扩增产物,建立RT-LAMP检测方法。进行敏感性、特异性检验,并与Real-time RT-PCR法进行比较。结果以LFD法和毛细管电泳法检测RT-LAMP扩增产物具有相同的敏感性和特异性;RT-LAMP-LFD检测SFTSV的敏感性为10copies RNA分子/反应,且与其他病毒无交叉反应。RT-LAMP-LFD和Real-time RT-PCR检测临床标本阳性率差异无统计学意义(P0.05),2种方法一致性好(Kappa=0.918)。结论建立的RT-LAMP方法快速、简单、操作简单,具有较高的敏感性和特异性,适合应用于基层单位和现场SFTSV的快速检测。
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| 关 键 词： | 发热伴血小板减少综合征 布尼亚病毒 逆转录-环介导等温扩增技术 快速检测 |
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