| CKS2 shRNA慢病毒表达载体的构建及其抑制卵巢癌A2780细胞增殖 |
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| 引用本文： | 董梦梦,孙倩玲,张灵芝,张佳乐,袁成福.CKS2 shRNA慢病毒表达载体的构建及其抑制卵巢癌A2780细胞增殖[J].基础医学与临床,2016(2):145-150. |
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| 作者姓名： | 董梦梦 孙倩玲 张灵芝 张佳乐 袁成福 |
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| 作者单位： | 三峡大学医学院,湖北宜昌,443002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，三峡大学人才启动基金，湖北省自然科学基金，大学生科技创新重点项目，三峡大学教学研究重点项目，肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室(三峡大学)开放基金 |
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| 摘 要： | 目的构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,并探讨CKS2敲除对卵巢癌细胞A2780增殖的影响。方法根据siRNA原理设计两对靶向CKS2的shRNA序列(shRNA1、shRNA2)及阴性对照NC shRNA,并克隆到慢病毒表达载体PLKO.1/puro中;将上述质粒转染到293T细胞并包装出慢病毒,用慢病毒感染卵巢癌细胞A2780,实时定量PCR及Western blot检测CKS2表达;MTT法检测A2780细胞增殖;Western blot检测PARP-1的剪切;流式细胞术检测凋亡。结果成功构建CKS2 shRNA慢病毒表达载体能明显降低A2780细胞中CKS2 mRNA及蛋白表达(P0.05);能显著抑制A2780靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,并包装出慢病毒;感染A2780细胞后,细胞增殖受抑(P0.05);能诱导PARP-1蛋白的剪切及凋亡(P0.05)。结论成功构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,能显著抑制A2780细胞增殖。
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| 关 键 词： | CKS2 卵巢癌 细胞增殖 选择性剪接 |
Construction of lentivirus expression vector of shRNA targeting at CKS2 gene and its inhibition on A2780 cell proliferation |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CKS2 ovarian cancer cell proliferation alternative splicing |
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