| ESRP1剪接变异体的克隆及其对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 杨一平,吴玉君,赵雯文,李杉,乐灿,卢诗倩,袁成福.ESRP1剪接变异体的克隆及其对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响[J].基础医学与临床,2016(2):161-166. |
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| 作者姓名： | 杨一平 吴玉君 赵雯文 李杉 乐灿 卢诗倩 袁成福 |
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| 作者单位： | 三峡大学医学院生物化学教研室,湖北宜昌,443002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，三峡大学人才启动基金，湖北省自然科学基金，大学生科技创新项目，三峡大学教学研究重点项目，肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室(三峡大学)开放基金 |
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| 摘 要： | 目的克隆ESRP1剪接变异体并构建其慢病毒表达载体,研究其对乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞增殖的影响。方法以OVCAR3细胞的c DNA为模板,PCR扩增ESRP1剪接变异体,将其连接到带有Myc标签的pCMV-Myc真核表达载体;再以该真核表达载体为模板,将含有Myc标签的ESRP1剪接变异体克隆到慢病毒表达载体p LVt TR/KRAB-Red上,从而构建带有Myc标签的ESRP1剪接变异体慢病毒表达载体;用该慢病毒表达载体转染293T细胞,包装慢病毒;用该慢病毒感染MDA-MB-231细胞,用MTT法检测该细胞增殖,用Western blot检测该细胞中PARP蛋白的表达。结果成功构建带有Myc标签的ESRP1剪接变异体慢病毒表达载体,并包装出慢病毒;用该慢病毒感染MDA-MB-231细胞后,与空载体对照组比较,ESRP1过表达能明显抑制MDA-MB-231细胞增殖(P0.05);ESRP1过表达能诱导PARP蛋白的剪切。结论成功构建带有Myc标签的ESRP1剪接变异体的慢病毒表达载体;ESRP1过表达能抑制MDA-MB-231细胞增殖,这可能与细胞死亡有关。
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| 关 键 词： | ESRP1 乳腺癌 细胞增殖 选择性剪接 |
Cloning of ESRP1 splicing variants and its effects on the proliferation of MDA-MB-231 breast cancer cell line |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ESRP1 breast cancer cell growth alternative splicing |
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