| C反应蛋白真核表达载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 陈腾祥,李红梅,胡水旺,刘靖华,姜勇.C反应蛋白真核表达载体的构建与表达[J].解放军医学杂志,2008,33(5):514-517. |
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| 作者姓名： | 陈腾祥 李红梅 胡水旺 刘靖华 姜勇 |
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| 作者单位： | 南方医科大学病理生理学教研室、广东省蛋白质组学重点实验室,广州,510515 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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教育部长江学者和创新团队发展计划
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国家自然科学基金委员会一广东省人民政府自然科学联合基金重点项目 |
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| 摘 要： | 目的构建人C反应蛋白(CRP)真核表达载体,并观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况。方法利用带HA反向互补序列碱基的特异性引物,从p91023/CRP载体上将编码人CRP的基因序列亚克隆到真核表达载体pcDNA3上;对阳性克隆进行PCR、酶切和测序鉴定,利用脂质体转染方法转染NIH3T3细胞;并使用Westernblot和细胞免疫化学技术对重组质粒pcDNA3/HA-CRP在NIH3T3细胞中的表达及其蛋白定位进行分析。结果PCR、双酶切和测序鉴定表明,pcDNA3/HA-CRP真核表达质粒构建正确;转染实验发现,该质粒能够在NIH3T3细胞中表达,表达产物主要定位在细胞膜和核周边内质网的区域。结论成功构建了带HA标签的人CRP真核表达载体,该载体能够在哺乳动物细胞NIH3T3中表达,为进一步研究CRP的细胞内生物学功能提供了一个重要的工具。
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| 关 键 词： | C反应蛋白 载体构建 基因表达 蛋白定位 |
| 修稿时间： | 2008年2月22日 |
Construction and expression of eukaryotic expression vector of C-reactive protein |
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| Chen Tengxiang,Li Hongmei,Hu Shuiwang,et al..Construction and expression of eukaryotic expression vector of C-reactive protein[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2008,33(5):514-517. |
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| Authors: | Chen Tengxiang Li Hongmei Hu Shuiwang |
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| Institution: | Chen Tengxiang,Li Hongmei,Hu Shuiwang,et al. Guangdong Provincial Key Laboratory for Functional Proteomics Research,Department of Pathophysiology,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | C-reactive protein vector construction gene expression protein localization |
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