基于MALDI-TOFMS鉴别产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的应用研究

目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）快速区分不同基因型产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的可行性。方法收集2019年1至12月浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院各类无污染体液标本中分离的肠杆菌目菌株共368株。采用MALDI-TOFMS进行菌种鉴定，通过VITEKIICompact进行常规药敏试验及ESBLs筛查试验，筛选产ESBLs以及产碳青霉烯酶的肠杆菌目细菌（CRE）。采用PCR检测CTX-M-1、CTX-M-9、TEM、SHV基因，同时利用ClinProTools3.0软件对各基因型菌株的质谱峰图进行分析。结果368株肠杆菌目细菌中共有169株产ESBLs，其中CTX-M型130株，以CTX-M-1型的CTX-M-55亚型（39株，占30.0%）、CTX-M-15亚型（34株，占26.2%）和CTX-M-9型的CTX-M-14亚型（38株，占29.2%）为主。共检出大肠埃希菌255株，其中产ESBLs大肠埃希菌152株，以CTX-M-1型（75株，占49.3%）和CTX-M-9型（58株，占38.2%）为主。通过ClinProTools3.0软件分析发现产CTX-M-9型大肠埃希菌在质荷比为6415m/z和13664m/z处具有特征性蛋白峰。结论产ESBLs菌株主要为大肠埃希菌，基因型主要为CTX-M-1型与CTX-M-9型。MALDI-TOFMS可以快速鉴别CTX-M-9型大肠埃希菌，对尽早指导临床用药具有一定意义。