| 实时荧光定量PCR检测RAGE mRNA方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 景蓉蓉,王惠民,鞠少卿,祝文彩,张志泉.实时荧光定量PCR检测RAGE mRNA方法的建立及初步应用[J].临床检验杂志,2008,26(1):55-58. |
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| 作者姓名： | 景蓉蓉 王惠民 鞠少卿 祝文彩 张志泉 |
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| 作者单位： | 南通大学附属医院,南通大学公共卫生学院,江苏南通,226001 |
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| 摘 要： | 目的 建立实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)检测人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达.方法 根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设计引物,应用SYBR Green Ⅰ荧光染料,建立检测RAGE mRNA的RTFQ-PCR方法,并对其线性、特异性、灵敏度及重复性进行评价;根据标准曲线计算出食管癌及配对远端正常组织中RAGE mRNA含量,并以RAGE mRNA和18S rRNA含量的比值作为评价RAGE mRNA表达水平指标.结果 线性范围为5.0×103～5.0×109copies/ml,相关系数为-0.98,批内变异系数(CV)为0.63%～8.71%,批间CV为1.52%～12.38%.食管癌及配对远端正常组织RAGE mRNA与18S rRNA浓度的对数比值(-x±s)分别为0.638±0.068和0.334±0.329(P＜0.005),提示食管癌组织RAGE表达上调.结论 RTFQ-PCR检测RAGE mRNA的方法具有灵敏、特异、重复性好等优点,RAGE mRNA表达水平与食管癌存在一定相关性.
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| 关 键 词： | 晚期糖基化终末产物受体 实时荧光定量PCR 食管癌 |
| 文章编号： | 1001-764X（2008）01-0055-04 |
| 收稿时间： | 2007-06-22 |
| 修稿时间： | 2007-08-11 |
Establishment of a real-time quantitative polymerase chain reaction for detection of human receptor for advanced glycation end products (RAGE) mRNA and its preliminary application |
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