重组霍乱毒素B亚单位的高效表达、纯化及鉴定

本研究采用基因工程技术,构建一种重组霍乱毒素B亚单位（rCT-B）的高效表达/分泌系统。 将CT-B结构基因ctxB与修饰的ompA信号序列融合,然后根据鼠伤寒杆菌阿拉伯糖操纵子的调节信号克隆入M13噬菌体并感染大肠杆菌。将此大肠杆菌接种于含0.2％阿位伯糖的LB肉汤中培养,检测培养物中rCT-B含量并通过S-SepharoseFF柱进行纯化。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、等电聚焦、质谱分析等方法对rCT-B的特性进行研究。