电针对阿尔茨海默病模型大鼠GSK3β信号通路相关蛋白的影响＊

目的 观察电针“百会”“肾俞”穴对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区GSK3β信号通路相关蛋白的影响及机制研究。方法 30只SPF级SD雄性大鼠随机分成假手术组、模型组和电针组,每组10只。除假手术组外,其余各组大鼠双侧海马区各注射5 μL β淀粉蛋白25-35（Aβ_25-35）制备AD模型,假手术组给予同等剂量生理盐水注射。假手术组、模型组正常喂养,不做干预处理,电针组选取百会及肾俞穴（两侧肾俞穴交替选择）进行电针治疗,频率2 Hz,电流1 mA,每日1次。每个疗程6天,共2个疗程,两个疗程间隔1天。治疗结束后第2天上午8点开始Morris水迷宫（Morris water maze,MWM）检测大鼠学习记忆能力,行为学实验结束后第2天取材。苏木精-伊红染色（Hematoxylin eosin staining,HE）观察海马CA1区病理形态改变。免疫组化法（Immunohistochemical method,IHC）检测大鼠海马区Tau蛋白磷酸化的表达,及糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase3β,GSK3β）信号通路相关蛋白表达。免疫印迹法（Western blot,WB）检测磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K）、蛋白激酶B（protein kinase B,AKT）、GSK3β相关蛋白的表达。聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）检测AKT、GSK3β mRNA的表达。结果 与假手术组相比：模型组大鼠逃避潜伏期明显延长（P < 0.01）,穿越平台次数明显减少（P < 0.01）,目标象限停留时间明显缩短（P < 0.01）;模型组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显提高（P < 0.01）,GSK3β蛋白表达水平明显提高（P < 0.01）;模型组PI3K（P85）、AKT（Ser473）、GSK3β（Ser9）蛋白相对表达量降低（P < 0.05）;模型组AKT mRNA表达水平明显降低（P < 0.01）,GSK3β mRNA表达水平明显提高（P < 0.01）。与模型组相比：电针组大鼠逃避潜伏期明显缩短（P < 0.01）,穿越平台次数明显增加（P < 0.01）,目标象限停留时间明显延长（P < 0.01）;电针组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显降低（P < 0.01）,GSK3β蛋白表达水平明显降低（P < 0.01）;电针组PI3K（P85）、AKT（Ser473）、GSK3β（Ser9）蛋白相对表达量增加（P < 0.05）;电针组AKT mRNA表达水平明显提高（P < 0.01）,GSK3β mRNA表达水平明显降低（P < 0.01）。结论 电针治疗能够有效改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与影响GSK3β信号通路相关蛋白表达从而抑制Tau蛋白磷酸化有关。