HBV相关肝脏纤维化患者血清miRNA差异表达谱建立及筛选

目的：分析并筛选HBV相关肝脏纤维化患者血清中差异表达miRNA。方法：选择2019年3月至2020年3月进入我院确诊为肝纤维化S2~S3期患者10例,以10例健康人作为对照,以血清作为研究样本。采用Illumina miRNA深度测序分析血清miRNA的表达。比较两组间差异表达的miRNA,对序列读数进行分析,以评估统计学意义。采用R平台进行分层聚类分析,以发现肝纤维化特异性表达的候选miRNA。采用qRT-PCR验证候选miRNA在各组中的表达,采用2-ΔΔCT分析miRNA的相对表达量。预测差异表达miRNA的靶基因,对靶基因进行GO分析。结果：在肝纤维化组和健康组之间,共筛选出78个表达具有显著性差异的miRNA。与健康组相比,肝纤维化组中表达上调的miRNA有30个,表达下调的miRNA有23个。其中,miR-505-3p、miR-197-3p、miR-500a-3p和miR-139-5p下调水平最高,miR-1273g-5p、miR-33a-5p 、miR-3960上调水平最高。选择表达变化最显著的miRNA进行qRT-PCR验证,结果与Illumina miRNA测序结果一致。结论：肝纤维化患者血清中miRNA的表达具有特异性,表达差异显著的miRNA有望成为新的肝纤维化临床诊断标志物。

Establishment and analysis of serum mi RNA differential expression profile in patients with H B V -associated liver fibrosis