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反义基因治疗对H9C2心肌细胞β_1受体表达的影响
引用本文:林纯莹,陈泗林,梁远红,周燕,余细勇.反义基因治疗对H9C2心肌细胞β_1受体表达的影响[J].岭南心血管病杂志,2008,14(2):140-143.
作者姓名:林纯莹  陈泗林  梁远红  周燕  余细勇
作者单位:1. 广东省人民医院广东省心血管病研究所,广州,510100
2. 武汉大学人民医院急诊科,武汉,000000
基金项目:中国博士后科学基金,广东省自然科学基金,广东省医学科学技术研究基金
摘    要:目的 观察阳离子脂质体介导的β1受体反义基因对H9C2心肌细胞β1受体mRNA及受体蛋白表达的影响,寻求最佳转染比率。方法 H9C-2心肌细胞,用去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)刺激24h后转染β1受体反义寡核苷酸(β1 antisense oligonucleotide,β1-AS-ODN),脂质体与β1-AS-ODN的混合摩尔比为2.0、2.5和3.0,分别转染18h、24h和36h;在倒置荧光显微镜下观察心肌细胞的形态;用免疫印迹技术测定心肌细胞β1受体蛋白的时间表达曲线。实验分为4组:NE组、NE加β1受体反向寡核苷酸(β1 inverse oligonucleotides,β1-IN-ODN)组、NE加β1-AS-ODN组、心肌细胞组,用半定量逆转录多聚酶链反应检测心肌细胞β1受体mRNA的表达。结果 β1-AS-ODN分布在心肌细胞的胞浆及细胞核中,转染24h效率达70%,此后平缓降低;NE组的心肌细胞β1受体蛋白显著升高;与NE组相比,脂质体与β1-AS-ODN的混合摩尔比2.0、2.5,和3.0的心肌细胞β1受体蛋白显著降低(P〈0.05,P〈0.01,P〈0.05);与心肌细胞组比较,NE组和β1-IN-ODN组的心肌细胞β1受体mRNA和受体蛋白显著升高(P〈0.01);与NE组相比,NE加AS-ODN组的心肌细胞β1受体mRNA和受体蛋白显著降低(P〈0.01)。结论 阳离子脂质体与β1-AS-ODN比率为2.5转染24h效果最好,其机制可能是通过激活核糖核酸酶H降解靶mRNA,在转录和翻译水平抑制目的基因表达。

关 键 词:β1受体  反义寡核苷酸  心肌细胞
文章编号:1007-9688(2008)02-0140-04
收稿时间:2008-2-18
修稿时间:2008年2月21日

Effects of β1 adrenoceptor antisense oligonucleotide on β1 adrenoceptor mRNA and protein in H9C2 myocardial cells
LIN Chun-ying,CHEN Si-lin,LIANG Yuan-hong,ZHOU Yan,YU Xi-yong.Effects of β1 adrenoceptor antisense oligonucleotide on β1 adrenoceptor mRNA and protein in H9C2 myocardial cells[J].South China Journal of Cardiovascular Diseases,2008,14(2):140-143.
Authors:LIN Chun-ying  CHEN Si-lin  LIANG Yuan-hong  ZHOU Yan  YU Xi-yong
Institution:LIN Chun-ying, CHEN Si-lin, LIANG Yuan-hong, ZHOU Yan, YU Xi-yong (1.Guangdong Provincial People's Hospital, Guangdong Provincial Cardiovascular Institute, Guangzhou 510100, China; 2.Department of Emergency, Wuhan University People's Hospital, Wuhan 430000, China)
Abstract:
Keywords:β1 receptor  Antisense oligonucleotide  Myocardial cell
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