健脾化瘀解毒方调控PI3K/Akt/HIF-1α 通路干预胃癌前病变大鼠胃黏膜上皮细胞自噬及凋亡

目的探讨健脾化瘀解毒方（JPHY）调控PI3K/Akt/HIF-1α 通路干预胃癌前病变（GPL）大鼠胃黏膜上皮细 胞自噬及凋亡的机制。方法采用200 μg·mL-1 N-甲基-N''-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）自由饮用+隔日禁食法 造模28 周复制GPL 模型。将SD 大鼠随机均分为空白组、模型组、维酶素组（270 mg·kg-1）、JPHY 高剂量 组（9 g·kg-1）和JPHY 低剂量组（4.5 g·kg-1），每组18 只。第15 周起，各给药组大鼠每天灌胃给药（10 mL·kg-1） 1 次，连续25 周。分别于第18、28 和39 周，每组随机取6 只大鼠，采用HE 染色法观察大鼠胃黏膜组织病 理学形态变化；Western Blot 法测定胃黏膜组织PI3K、Akt、HIF-1α、Beclin1、Bcl-2、BAX 蛋白的表达。 结果与空白组比较，模型组大鼠胃黏膜组织固有腺变薄，非固有腺锯齿样变，弥漫性细胞空泡样变，固有 腺细胞变为体积小、胞质少、核质比例大、深染的异型增生细胞，呈假复层、跨腺腔灶状分布，有炎性细胞浸 润，表现为以肠上皮化生为主；第18 周，大鼠胃黏膜组织的PI3K、Akt 蛋白表达明显下调（P < 0.05，P < 0.01），HIF-1α、Beclin1、Bcl-2 蛋白表达及Bcl-2/BAX 比值明显上调（P < 0.05，P < 0.01）；第28 周，PI3K、 Akt、BAX 蛋白表达明显下调（P < 0.05，P < 0.01），HIF-1α、Beclin1 蛋白表达及Bcl-2/BAX 比值明显上 调（P < 0.01）；第39 周，Akt 蛋白表达明显下调（P < 0.05），HIF-1α、Beclin1、Bcl-2 蛋白表达及Bcl-2/BAX 比值明显上调（P < 0.05，P < 0.01），PI3K、BAX 蛋白表达差异无统计学意义（P > 0.05）。与模型组比较， JPHY 高剂量组的胃黏膜改善作用最明显，异型增生细胞数量、分布范围和分布密度有明显减少，固有层厚度 明显增加，腺腔结构趋于正常；第18 周的PI3K、Akt 蛋白表达明显上调（P < 0.01），HIF-1α、Bcl-2 蛋白表达 及Bcl-2/BAX 比值明显下调（P < 0.05）；第28 周的PI3K、Akt、BAX 蛋白表达明显上调（P < 0.05，P < 0.01），HIF-1α、Beclin1 蛋白表达及Bcl-2/BAX 比值表达明显下调（P < 0.01）；第39 周Akt 蛋白表达明显上 调（P < 0.01），HIF-1α、Beclin1 蛋白表达及Bcl-2/BAX 比值明显下调（P < 0.05，P < 0.01）。结论JPHY 对 GPL 不同阶段的黏膜损伤均有明显保护作用，可能与其通过PI3K/Akt/HIF-1α 通路调节肿瘤缺氧微环境以及调 控细胞自噬、凋亡作用有关。