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慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞及其培养
引用本文:李宁,朱宝长,朱宛宛,王淑艳,任萍,关云谦,张愚.慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞及其培养[J].基础医学与临床,2008,28(10):1083-1087.
作者姓名:李宁  朱宝长  朱宛宛  王淑艳  任萍  关云谦  张愚
作者单位:1. 首都医科大学,宣武医院,老年病研究所,细胞治疗室,北京,100037;首都师范大学,生命科学学院,北京,100037
2. 首都师范大学,生命科学学院,北京,100037
3. 首都医科大学,宣武医院,老年病研究所,细胞治疗室,北京,100037;首都医科大学,宣武医院,教育部神经变性病重点实验室,北京,100053
基金项目:国家自然科学基金 , 国家重点基础研究发展计划(973计划) , 北京市科委科技基金  
摘    要:目的 稳定培养人胚胎干细胞,并通过慢病毒载体对其进行绿色荧光蛋白标记.方法 利用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层或Matrigel作为基质培养人胚胎干细胞,包装带有GFP序列的慢病毒转染人胚胎干细胞.对转染前后的人胚胎干细胞进行了碱性磷酸酶和SSEA-3免疫组化鉴定.结果 在MEF饲养层和Matrigel上均可培养出呈克隆样生长,表达标志抗原的人胚胎干细胞,经慢病毒转染及抗生素筛选后仍可稳定表达GFP.结论 成功地培养了人胚胎干细胞系,并进行了GFP标记.

关 键 词:人胚胎干细胞  绿色荧光蛋白  慢病毒
收稿时间:2007-11-21
修稿时间:2008-1-25

Lentiviral vectors mediates GFP transfection and human embryonic stem cell culture
LI Ning,ZHU Bao-chang,ZHU Wan-wan,WANG Shu-yan,REN Ping,GUAN Yun-qian,ZHANG Yu.Lentiviral vectors mediates GFP transfection and human embryonic stem cell culture[J].Basic Medical Sciences and Clinics,2008,28(10):1083-1087.
Authors:LI Ning  ZHU Bao-chang  ZHU Wan-wan  WANG Shu-yan  REN Ping  GUAN Yun-qian  ZHANG Yu
Abstract:
Keywords:
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