| 实时荧光定量PCR检测血清miR-375表达及临床应用 |
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| 引用本文： | 陈鑫,韩霜,臧素纲,宣世海,汪晓莺,周玉贵.实时荧光定量PCR检测血清miR-375表达及临床应用[J].检验医学与临床,2015(9). |
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| 作者姓名： | 陈鑫 韩霜 臧素纲 宣世海 汪晓莺 周玉贵 |
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| 作者单位： | 1. 南通大学附属东台医院检验科,江苏东台,224200
2. 南通大学医学院免疫教研室,江苏南通,226001 |
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| 基金项目： | 江苏省盐城市医学科技发展计划项目(YK20130103)。 |
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| 摘 要： | 目的建立ploy(A)聚合酶加尾的SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清miR-375,并进行临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-375ploy(A)聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR GreenⅠ实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,绝对定量血清中miR-375的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-375表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在103~106 copy/μL范围内有良好的线性关系(r2=0.997),并且检测重复性好。糖尿病患者血清中miR-375表达水平明显高于健康体检者,差异有统计学意义(P0.05)。结论所建立的ploy(A)聚合酶加尾SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR能敏感、特异地检测血清中miR-375的表达水平,为下一步临床应用研究奠定了方法学基础。
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| 关 键 词： | SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应 miR-375 糖尿病 |
Real-time fluorescence quantitative PCR for detecting expression of serum miR-375 and its clinical application |
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| CHEN Xin,HAN Shuang,ZANG Su-gang,XUAN Shi-hai,WANG Xiao-ying,ZHOU Yu-gui.Real-time fluorescence quantitative PCR for detecting expression of serum miR-375 and its clinical application[J].Laboratory Medicine and Clinic,2015(9). |
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| Authors: | CHEN Xin HAN Shuang ZANG Su-gang XUAN Shi-hai WANG Xiao-ying ZHOU Yu-gui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SYBR Green I real-time fluorescence quantitative PCR miR-375 diabetes mellitus |
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