姜黄素诱导激活FOXO3a促进肾透明细胞癌细胞的增殖抑制和细胞凋亡

目的:研究姜黄素(curcumin)对人肾透明细胞癌（clear-cell renal cell carcinoma，ccRCC）细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用，及叉头框蛋白O3a（Forkhead box protein O3a，FOXO3a）在姜黄素抗肿瘤效应中发挥的关键作用。方法:MTT法用于检测姜黄素对ccRCC细胞活力的抑制作用；Annexin V/PI双染实验检测姜黄素对ccRCC细胞的诱导凋亡作用；免疫印迹法（Western blot，WB）检测姜黄素对FOXO3a、p-FOXO3a及下游BIM表达的影响，和凋亡蛋白caspase 3的激活情况。实时荧光定量PCR技术（real-time quantitative PCR，RT-qPCR）检测FOXO3a转录水平。小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）技术用于沉默ccRCC细胞系中FOXO3a的表达。结果:通过对6种ccRCC细胞系（ACHN、786-O、769-P、A-498、Caki-1及Caki-2）FOXO3a蛋白基础表达水平进行检测，选取FOXO3a表达较高的786-O细胞系为研究对象。0~160 μmol/L姜黄素处理786-O细胞24 h和48 h后，呈时间和浓度依赖性对细胞活力具有显著抑制作用；786-O细胞在0~80 μmol/L姜黄素处理24 h后，明显促进细胞凋亡水平，且伴随着凋亡相关蛋白caspase 3的激活。786-O细胞中，姜黄素抑制p-FOXO3a，促进FOXO3a活化，并上调下游BCL-2家族促凋亡蛋白BIM表达水平。在siRNA沉默FOXO3a蛋白表达后，姜黄素对786-O细胞的生长抑制和诱导凋亡作用被抑制。结论:姜黄素通过诱导激活FOXO3a，在ccRCC细胞上发挥生长抑制和诱导凋亡的抗肿瘤作用。

Effects of curcumin on proliferation inhibition and apoptosis induction of clear-cell renal cell carcinoma via FOXO3a activation