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| 重组人脂联素真核表达载体的构建及表达 | |
| 引用本文： | 佘其美,石献忠,王长江,王佑民,代芳,杨明功.重组人脂联素真核表达载体的构建及表达[J].中国现代医学杂志,2007,17(16):1927-1930. |
| 作者姓名： | 佘其美 石献忠 王长江 王佑民 代芳 杨明功 |
| 作者单位： | 1. 北京市石景山医院,内分泌科,北京,100043 2. 北京大学医学部人体解剖学教研室,北京,100083 3. 安徽医科大学第一附属医院,内分泌科,安徽,合肥,230022 |
| 摘 要： | 目的为进一步研究脂联素(ADPN)的功能提供实验基础,构建含重组人脂联素(hADPN)真核表达载体的3T3-L1细胞株。方法酶切载有人脂联素cDNA的重组克隆质粒pMD18-T和真核表达质粒pcDNA3.1 ,回收目的基因片段与线性化的真核表达质粒,经连接、转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,经酶切和核苷酸序列测定鉴定。脂质体法转染3T3-L1细胞,G418筛选阳性细胞克隆扩增,通过RT-PCR的方法逆转录合成脂联素基因片段。结果重组真核表达质粒酶切后获得5.4kb和800bp两个片段,大小与理论值一致。并经核苷酸序列测定证实。RT-PCR产物经凝胶电泳后于紫外分析仪下可见在250bp前有一清晰条带,和扩增目的基因片段长度234bp一致。结论成功地构建了人重组脂联素真核表达质粒并在3T3-L1细胞中稳定表达。 |
| 关 键 词： | 脂联素 真核表达 3T3-L1细胞 |
| 文章编号： | 1005-8982（2007）16-1927-04 |
| 收稿时间： | 2007-03-08 |
| 修稿时间： | 2007年3月8日 |
Construction and expression of eukaryotic recombinant with human complete adiponectin cDNA |
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| SHE Qi-mei,SHI Xian-zhong,WANG Chang-jiang,WANG You-min,DAI Fang,YANG Ming-gong.Construction and expression of eukaryotic recombinant with human complete adiponectin cDNA[J].China Journal of Modern Medicine,2007,17(16):1927-1930. | |
| Authors: | SHE Qi-mei SHI Xian-zhong WANG Chang-jiang WANG You-min DAI Fang YANG Ming-gong |
| Institution: | 1.Department of Endocrinology, Shijingshan Hospital of Beijing, Beijing 100043, P.R.China; 2. Anatomy department, Peking University Health Science Center, Beijing 100083, P.R. China;3.Department of Endocrinology, the First Affiliated Hospital of A nhui Medical University, Hefei, A nhui 230022, P.R.China |
| Abstract: | |
| Keywords: | adiponectin eukaryotic expressing 3T3-L1 adipocytes |
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