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靶向沉默PPP1R16A基因可抑制肝癌细胞的增殖
引用本文:毕峰瑞,周传传,袁继行,孙树汉. 靶向沉默PPP1R16A基因可抑制肝癌细胞的增殖[J]. 第二军医大学学报, 2016, 37(5): 529-535. DOI: 10.16781/j.0258-879x.2016.05.0529
作者姓名:毕峰瑞  周传传  袁继行  孙树汉
作者单位:第二军医大学基础部医学遗传学教研室,上海,200433
基金项目:国家自然科学基金(81330037).
摘    要:目的 观察和比较在人肝癌与癌旁组织中蛋白磷酸酶1调节亚基16A(protein phosphatase 1 regulatory subunit 16A,PPP1R16A)基因在基因组和转录水平的差异,探讨靶向沉默PPP1R16A基因对肝癌细胞HCC LM3增殖能力的影响.方法 收集106例肝癌患者的肿瘤组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR技术检测PPP1R16A基因的基因组和转录水平.体外合成PPP1R16A序列特异性小干扰RNA(siRNA),使用脂质体法转染肝癌细胞株HCC LM3.实验分si-16A组(针对PPP1R16A的特异性siRNA转染的HCC LM3细胞)、NC组(非特异性siRNA转染的HCC LM3细胞)、空白组(未转染siRNA的HCC LM3细胞),用实时荧光定量PCR检测PPP1R16A基因拷贝数和转录水平,用蛋白质印迹法检测PPP1R16A蛋白表达,用CCK-8实验、克隆形成实验检测细胞增殖和克隆形成能力,用流式细胞术检测细胞周期.结果 人肝癌组织中PPP1R16A基因的拷贝数和转录表达水平均高于癌旁组织(P<0.01),且两者具有相关性(P=0.015).CCK-8实验和克隆形成实验显示,转染siRNA后,si-16A组细胞增殖低于NC组和空白组(P<0.001).流式细胞术结果显示,si-16A组较NC组和空白组细胞周期被抑制.结论 肝癌组织中PPP1R16A的拷贝数发生扩增,基因转录上调.靶向沉默PPP1R16A能抑制肝癌细胞HCC LM3的增殖能力.提示PPP1R16A基因在肝癌中发挥癌基因的作用.

关 键 词:肝肿瘤  肝细胞癌  PPP1R16A  细胞增殖  拷贝数变异
收稿时间:2016-01-11
修稿时间:2016-03-06

RNAi-mediated PPP1R16A gene silencing suppresses proliferation of hepatocellular carcinoma cells
BI Feng-rui,ZHOU Chuan-chuan,YUAN Ji-hang and SUN Shu-han. RNAi-mediated PPP1R16A gene silencing suppresses proliferation of hepatocellular carcinoma cells[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2016, 37(5): 529-535. DOI: 10.16781/j.0258-879x.2016.05.0529
Authors:BI Feng-rui  ZHOU Chuan-chuan  YUAN Ji-hang  SUN Shu-han
Affiliation:Department of Medical Genetics, College of Basic Medical Sciences, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China*Corresponding author
Abstract:
Keywords:liver neoplasms  hepatocellular carcinoma  PPP1R16A  cell proliferation  copy number variation
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