应用酚提取法纯化孕妇血浆及血清中胎儿游离DNA

目的：应用酚提取法以提高纯化孕妇血中胎儿DNA的浓度，并应用套式PCR技术确定男性胎儿SRY基因的存在。方法：孕妇血浆和血清5-10ml采自孕龄为7-38周孕1产0的孕妇26名。其中孕男性单胎正常孕妇18名，孕女胎正常孕妇8名。加入等体积的苯酚：氯仿：异戊醇抽提，并经冰浴离心，所得DNA应用套式PCR技术确定男性胎儿SRY基因的存在。结果：血浆标本在第1次PCR扩增后有12名出现351bp的阳性一扩增带。其余6名在第2次扩增后出现254bp的阳性扩增带。第1次扩增确定性别的准确率是72.2%，第2次扩增是100%。血肖标本在第1次扩增后有9名出现351bp阳性扩增带，第2次有16名出现254bp阳性扩增带。第1次扩增确定性别的准确率为50%，两次准确率共为88.9%。同时对2例X-连锁遗传病患者（假性肥大性肌营养不良症和无汗性外胚层发育不良症的患者）进行了产前性别判断。结论：单纯应用酚提取的方法也可以纯化孕妇血浆及血清中胎儿游离DNA的浓度，可以应用较大量的孕妇血浆及血清进行DNA提取，以获得较高胎儿DNA的浓度。加用套式PCR使确定胎儿性别的准确率得到提高。提示可用此方法对有X-连锁遗传病家族史的患者进行产前性别判断 。