| 流行性乙型脑炎病毒NS4A蛋白基因的克隆及其在大肠埃希菌的表达 |
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| 引用本文： | 冯国和,王玉梅,刘宁,王占英,刘沛,竹上勉. 流行性乙型脑炎病毒NS4A蛋白基因的克隆及其在大肠埃希菌的表达[J]. 中国医科大学学报, 2005, 34(6): 497-499 |
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| 作者姓名： | 冯国和 王玉梅 刘宁 王占英 刘沛 竹上勉 |
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| 作者单位： | 1. 中国医科大学附属第二医院感染科,辽宁,沈阳,110004
2. 日本金泽医科大学综合医学研究所 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目，国家留学回国人员科研启动基金，辽宁省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:克隆及表达流行性乙型脑炎病毒(JEV)NS4A蛋白基因.方法:JEV JaGAr-01株感染C6/36细胞,RT-PCR法获取JEV NS4A蛋白基因并采用ABI PRSMTM310 Genetic Analyzer进行DNA测序分析,PCR克隆方法将RT-PCR产物构建于原核表达载体PET-3a的BamHI与EcoRI酶切位点并命名为pNS4A,电泳进行限制性内切酶分析.结果:JEV NS4A蛋白基因大小为446 bp,DNA测序与发表的JEV JaGAr-01株相对应的DNA序列相符合,酶切后从重组质粒释出的插入子与JEV NS4A蛋白基因大小相一致.pNS4A在原核细胞内表达的特异蛋白分子量约16 kDa,与JEV NS4A蛋白理论计算相一致.结论:获取的JEV NS4A蛋白基因来自于JaGAr-01野生株,pNS4A在大肠埃希菌中表达的蛋白产物为JEV NS4A蛋白.
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| 关 键 词： | 流行性乙型脑炎病毒 DNA测序 限制性内切酶分析 蛋白表达 |
| 文章编号： | 0258-4646(2005)06-0497-03 |
| 收稿时间： | 2004-11-10 |
| 修稿时间： | 2004-11-10 |
Cloning and expression of gene encoding NS4A protein derived from Japanese encephalitis virus in Escherichia coli |
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| FENG Guo-he,WANG Yu-mei,LIU Ning,WANG Zhan-ying,LIU Pei,Takegami Tsutomu. Cloning and expression of gene encoding NS4A protein derived from Japanese encephalitis virus in Escherichia coli[J]. Journal of China Medical University, 2005, 34(6): 497-499 |
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| Authors: | FENG Guo-he WANG Yu-mei LIU Ning WANG Zhan-ying LIU Pei Takegami Tsutomu |
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| Affiliation: | 1. Department of Infectious Diseases, The Second Affiliated Hospital, China Medical University, Shenyang 110004, China; 2. Medical Institute, Kanazawa Medical University, Japan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pNS4A |
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