| 摘 要： | 目的通过比较京尼平苷(geniposide,GS)及其体内代谢产物京尼平(genipin,GP)的Hep G2肝细胞毒性,进一步明确中药栀子致肝毒性的物质基础,并探讨其毒性作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度GS与GP的细胞毒作用;试剂盒法测定细胞中锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及谷胱甘肽(GSH)含量;二乙酸-2',7'-二氯荧光素(DCFH-DA)染色法测定胞内活性氧(ROS)的变化;高内涵细胞分析技术(high content screening,HCS)进行多参数细胞毒性(细胞数量、核尺寸及形态、核DNA含量、细胞膜通透性、线粒体膜电位和细胞色素C)分析。结果 GS(20~1 000μmol·L~(-1))对Hep G2细胞无明显细胞毒作用(P>0.05),50μmol·L~(-1)GP可明显抑制Hep G2细胞增殖(P<0.05),IC50值为(450.00±26.15)μmol·L~(-1);GS对胞内Mn-SOD、CAT、GSH、ROS含量无明显影响(P>0.05),GP孵育细胞后,引起胞内Mn-SOD、CAT活性明显下降,GSH含量明显降低,并可明显增加ROS的生成(P<0.05或P<0.01);50、500、1 000μmol·L~(-1)GP可明显降低线粒体膜电位,促进细胞色素C的释放,升高细胞膜通透性(P<0.05或P<0.01),500、1 000μmol·L~(-1)GP组还可观察到明显的核固缩以及核荧光强度的升高,细胞数量的明显下降(P<0.01),1 000μmol·L~(-1)GS对上述细胞毒性参数无明显影响(P>0.05)。结论 GP是栀子致肝细胞毒性的直接物质基础,氧化应激所导致的线粒体损伤与细胞凋亡是GP引起肝毒性的主要机制。
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