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| NT-3真核过表达载体的构建及其在大鼠MSCs中的表达 | |
| 作者单位： | ;1.广州医科大学机能学实验中心;2.广州医科大学生理教研室;3.广州医科大学附属第五医院皮肤科 |
| 摘 要： | 目的构建p CDNA3.1-NT-3真核过表达载体,鉴定其在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)中的表达。方法从SD大鼠脑中提取并扩增NT-3基因,并将其克隆入p CDNA3.1中,构建p CDNA3.1-NT-3真核载体;原代培养大鼠间充质干细胞,将p CDNA3.1-NT-3通过Lip2000介导转染至大鼠MSCs;用RT-PCR、免疫荧光法、Western blot法检测NT-3在MSCs中的表达。结果扩增的NT-3基因序列正确,并成功连接到真核载体p CDNA3.1中;转染MSCs后,RT-PCR、免疫荧光、Western blot结果显示MSCs中过表达NT-3的m RNA和蛋白。结论 p CDNA3.1-NT-3真核载体构建成功,转染MSCs后能在细胞中正确过表达,为进一步NT-3基因修饰的MSCs治疗癫痫的研究奠定了实验基础。 |
| 关 键 词： | NT-3 骨髓间充质干细胞 癫痫 |
Construction of Eukaryotic Overexpression Vector of NT-3 and Its Expression in Rats Mesenchymal Stem Cells |
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