|
|||||
|
|
| 大鼠GAD65基因慢病毒载体的构建及其在MSCs中的表达 | |
| 引用本文： | 赵元淑,邓镇,陈丽,周玉波,马猛,罗亚楠,胡景鑫,雷水生,朱晓琴.大鼠GAD65基因慢病毒载体的构建及其在MSCs中的表达[J].中风与神经疾病杂志,2015,32(5):398-401. |
| 作者姓名： | 赵元淑 邓镇 陈丽 周玉波 马猛 罗亚楠 胡景鑫 雷水生 朱晓琴 |
| 作者单位： | 1. 广州医科大学机能学实验中心,广东广州,511436 2. 广州医科大学生理教研室,广东广州,511436 3. 广州医科大学附属第五医院皮肤科,广东广州,510700 |
| 摘 要： | 目的构建谷氨酸脱羧酶65(glutamic acid decarboxylase 65,GAD65)重组慢病毒表达载体,感染间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行鉴定。方法 PCR法扩增GAD65基因,构建LV5-GFP-GAD65慢病毒载体;与包装质粒共转染293T细胞包装病毒;将慢病毒感染大鼠MSCs,荧光显微镜鉴定转染率,Western blot检测GAD65的表达。结果双酶切及测序结果表明LV5-GFP-GAD65慢病毒载体构建成功;包装病毒产生的病毒液滴度为5×107TU/ml;慢病毒感染大鼠MSCs的转染率高于90%,Western blot结果显示GAD65蛋白表达比对照组明显升高。结论 GAD65重组慢病毒载体构建成功,包装得到高浓度病毒液,感染大鼠MSCs能稳定过表达GAD65蛋白,为进一步探索侧脑室注射基因化的MSCs治疗癫痫奠定实验基础。 |
| 关 键 词： | 慢病毒 GAD65 间充质干细胞 癫痫 |
Construction of lentiviral vectors carrying GAD65 gene and its expression in bone marrow mesenchymal stem cells |
|
| Abstract: | |
| Keywords: | Lentivirus GAD65 Mesenchymal stem cells Epilepsy |