| 摘 要： | 目的:应用RNA干扰(RNAi)技术沉默Skp2(Skp2)基因,研究其对人大肠癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:建立裸鼠大肠癌皮下移植瘤模型,随机分为3组:PBS组,阴性对照序列组(Skp2-NC组),RNA干扰组(Skp2-siRNA组)。分别于瘤体内局部注射PBS、腺病毒Ad-Skp2-NC、腺病毒Ad-Skp2-siRNA,每3d注射1次,共3次。4周后分离瘤体,观察肿瘤抑瘤率并绘制生长曲线。采用蛋白印迹技术检测瘤体中Skp2、p27蛋白表达;免疫组化法检测肿瘤内增殖细胞核抗原(PCNA)表达量变化;原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞凋亡。结果:Skp2-siRNA组抑瘤率为32.40%,与PBS组和Skp2-NC组比较差异有统计学意义(P<0.05);Skp2-siRNA组Skp2蛋白表达下调,p27蛋白表达增多;PCNA表达量显著低于PBS组和Skp2-NC组;Skp2-siRNA组凋亡细胞相对光密度值为(255.73±1.77)%,与PBS组(100.00±0.47)%和Skp2-NC组(93.07±1.17)%相比,明显增高。结论:Skp2-siRNA能有效抑制裸鼠体内人大肠癌SW480细胞株增殖并促进其凋亡,具有显著的抑瘤效果。
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