苦瓜MAP30基因的克隆与载体构建 |
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引用本文: | 袁超,王舒然,王福祥.苦瓜MAP30基因的克隆与载体构建[J].哈尔滨医科大学学报,2010,44(2). |
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作者姓名: | 袁超 王舒然 王福祥 |
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作者单位: | 1. 哈尔滨医科大学第一临床医学院,感染科,黑龙江,哈尔滨,150001;哈尔滨医科大学公卫学院营养与食品卫生教研室,黑龙江,哈尔滨,150081 2. 哈尔滨医科大学公卫学院营养与食品卫生教研室,黑龙江,哈尔滨,150081 3. 哈尔滨医科大学第一临床医学院,感染科,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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基金项目: | 黑龙江省自然科学基金,黑龙江省教育厅科学技术研究(面上)项目计划 |
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摘 要: | 目的对苦瓜中MAP30基因进行克隆,并采用基因工程手段构建植物表达载体。方法从苦瓜中提取基因组DNA,根据Genbank中已公开发表的MAP30序列,设计1ST-S、1ST-A、2nd-A 3个引物,并添加了SEKDEL序列、Kozak序列和组氨酸标签,采用PCR技术,从苦瓜的基因组DNA中扩增出一分子量在800~1 000 bp之间的片段,回收克隆测序。结果克隆获得片段与已公开发表的MAP30序列同源性达100%,对PCR检测阳性的质粒进行测序分析,目的基因已成功连接到pBI121载体上,构建成植物表达载体。结论成功构建MAP30基因植物表达载体,为将MAP30基因转入番茄、烟叶中,进一步大量获得MAP30奠定基础。
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关 键 词: | 苦瓜 载体构建 |
Cloning and expression vector construction of MAP30 gene from bitter melon |
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Abstract: | |
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Keywords: | MAF30 PCR |
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