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人羊膜上皮细胞分泌神经营养因子诱导人脐血间充质干细胞向神经元样细胞的分化:可能性验证
引用本文:张晓明,孙海梅,杨慧,季凤清.人羊膜上皮细胞分泌神经营养因子诱导人脐血间充质干细胞向神经元样细胞的分化:可能性验证[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(6).
作者姓名:张晓明  孙海梅  杨慧  季凤清
作者单位:1. 首都医科大学组织胚胎学系,北京市,100069
2. 首都医科大学神经生物学系,北京市,100069
基金项目:北京市教委科技发展计划项目,课题名称"脐带血间充质干细胞移植治疗帕金森病的实验研究",北京市自然科学基金(7082017)m课题名称"人脐带血CD166+细胞在帕金森病治疗中的作用" 
摘    要:背景:课题组前期实验已证实人羊膜上皮细胞条件培养液可以诱导人脐血间充质干细胞分化为多巴胺能神经元样细胞,在此过程中人羊膜上皮细胞分泌的神经营养因子及其受体可能起到了重要作用.目的:探讨人羊膜上皮细胞分泌的神经营养因子对人脐血间充质干细胞神经分化的作用.方法:将P1代人脐血间充质干细胞按2×10~8 L~(-1)密度接种,分为3组:对照组加入HG-DMEM培养基;诱导组加入人羊膜上皮细胞条件培养液;阻断剂组预先加入阻断剂K252a工作液,36 ℃孵育40 min后更换为羊膜上皮细胞条件培养液.免疫荧光化学检测诱导后人脐血间充质干细胞神经元特异性烯醇化酶及多巴胺转运体的表达,实时定量PCR法检测诱导后人脐血间充质干细胞中神经元特异性烯醇化酶、多巴胺转运体及酪氨酸羟化酶的表达.结果与结论:人羊膜上清中有神经生长因子和脑源性神经营养因子的表达,且P1代人脐血间充质干细胞表达神经营养因子高黏附性受体Trka及Trkb.诱导48 h后与对照组比较,诱导组及阻断剂组神经元特异性烯醇化酶、多巴胺转运体阳性细胞数均明显增加(P < 0.05),且诱导组阳性细胞数最多(P < 0.05).诱导组、阻断剂组神经元特异性烯醇化酶、多巴胺转运体及酪氨酸羟化酶mRNA含量均显著高于对照组(P < 0.01),且诱导组各基因mRNA含量明显高于阻断剂组(P < 0.01).结果证实人羊膜上皮细胞分泌的神经营养因子对人脐血间充质干细胞的神经分化有重要作用,其促神经分化作用是通过酪氨酸激酶受体介导的.

关 键 词:神经营养因子  人脐血间充质干细胞  羊膜上皮细胞  诱导  阻断  干细胞

Human amniotic epithelial cells-secreted neurotrophic factors induces the differentiation of human umbilical cord blood mesenchymal stem cells into neuron-like cells:Possibility verification
Zhang Xiao-ming,Sun Hai-mei,Yang Hui,Ji Feng-qing.Human amniotic epithelial cells-secreted neurotrophic factors induces the differentiation of human umbilical cord blood mesenchymal stem cells into neuron-like cells:Possibility verification[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(6).
Authors:Zhang Xiao-ming  Sun Hai-mei  Yang Hui  Ji Feng-qing
Institution:Zhang Xiao-ming1,Sun Hai-mei1,Yang Hui2,Ji Feng-qing1 1Department of Histology , Embryology,2Institute for Neuroscience,Capital Medical University,Beijing 100069,China
Abstract:BACKGROUND:Group pre-test has confirmed that amnion endothelial cell conditioned medium can induce human umbilical cord blood mesenchymal stem cells into dopaminergic neuron-like cells.In this process,neurotrophic factors and their receptors may play an important role.OBJECTIVE:To study the function of neurotrophic factors secreted by amniotic epithelial cells in the differentiation of human umbilical cord blood mesenchymal stem cells into neurons.METHODS:P1 human umbilical cord blood mesenchymal stem cells...
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