骨髓间充质干细胞诱导分化成心肌细胞表型的调控机制研究

目的：通过基因芯片等技术对BMSCs向心肌分化过程的研究，寻找启动心肌分化的特异基因。方法：BM-SCs的体外培养，与乳鼠心肌细胞共培养后0．5周，2周，8周，提取细胞总RNA，以未诱导的BMSCs作对照，进行人类全基因组芯片检测。用RT-PCR检测心肌分化相关的基因的时序表达。结果：基因芯片比较BMSCs诱导前后差异基因的表达水平，发现诱导0．5周、2周和8周时表达明显升高（ratio〉5）的基因分别是54个、572个和634个，表达下调（ratio〈0．2）的基因分别是57个、336个和1874个。TNNT2是三组细胞都表达升高的基因。随着时间的推移．表达上调的基因逐步增加，同时下调基因也增加，尤其是第8周。基因的时序性表达发现HOP，Nkx2．5和GATA4基因在诱导前几乎没有检测到阳性表达，诱导后0．5周表达增强，1-2周表达达到高峰，维持一定水平后到4-8周表达呈下降趋势。心肌特异性基因β-MHC和ANF在0．5周开始出现，表达随时间逐渐增加，2周达到高峰。结论：分化诱导相关基因如IGF，FGF等的表达与心肌发育分化相关，转录因子在心肌分化过程中起重要作用。然而心肌的分化实际上极为复杂，转录因子间相互作用的因素，尚需进一步探讨。